混合蛋白胨制成干粉培养基生产猪丹毒杆菌活疫苗的试验探讨

。：ｉｉｉｉ！ｌ　吉林畜牧兽医２０１２耳　第７期　混合蛋白胨制成干粉培荠基生产　猪丹毒杆菌活疫苗的试验捻讨　李红霞　，王永茂　，张燕　，纪新花　，李晓香　，刘斌　，张新民　１．辽宁益康生物股份有限公司，辽宁沈阳　１１１０００；２．河南省安阳市动物疫病预防控制中心，　河南安阳４５５０００　摘要：用自制Ⅱ号培养基和Ｉ号培养基分别生产猪丹毒杆菌活疫苗各３批，用Ⅱ号培养基生产的疫苗平均　菌数为３０５　Ｘ　１０。ＣＦＵ／ｍＬ；用Ｉ号培养基生产的疫苗平均菌数为２４８　Ｘ　１０　ＣＦＵ／ｍＬ。结果表明Ⅱ号培养基优　于Ｉ号培养基。　关键词：蛋白胨；培养基；茵数　培养基是用人工的方法将多种营养物质按　照微生物生长代谢的需要而制成，针对猪丹毒杆　菌对营养物质的需求，培养基中应含满足猪丹毒　杆菌生长发育且比例合适的水分、碳源、氮源、无　机盐、生长因子以及微量元素等物质。笔者就氮　源而选择了不同厂家生产的蛋白胨，由于各个厂　家组成成分上也有差异，笔者就国产蛋白胨和国　产加进口混合蛋白胨进行制造干粉培养基，并用　于大生产培养进行对比试验。　１材料与方法　１－３　培养基配方　Ｉ号培养基：北京蛋白胨２．５％、氯化钠Ｏ．３％、　酵母浸粉０．５％、磷酸二氢钾０．１％、牛肉浸粉０．３％、　１．１　菌种　猪丹毒杆菌ＧＣ４２弱毒株，由哈尔滨兽医研　核黄素Ｏ．００　１％、硫代硫酸钠０．０３％、磷酸氢二钠　究所提供。　０．８％。　１．２　试剂　１．２．１　蛋白胨　ＩＩ号培养基：北京蛋白胨１．５％、日本蛋白胨　０．５％、英国蛋白胨０．５％、氯化钠０．３％、酵母浸粉　０．５％、磷酸二氢钾０．１％、牛肉浸粉０．３％、核黄素　０．００１％、硫代硫酸钠Ｏ．０３％、磷酸氢二钠０．８％。　分别为北京奥博星生物科技有限公司生产、　北京中科恒益科技有限公司经销（日本生产）和北　生物试剂。　１．２．２其他　４　方法　京医海麦迪森科技有限公司经销（英国生产）的　１．１．４．１培养基制备　Ｉ号培养基和ＩＩ号培养基分别按比例溶解　酵母浸粉、氯化钠、磷酸二氢钾、牛肉浸粉、　后，分别配制２００　０００　ｍＬ，用２　Ｎ的氢氧化钠溶液　核黄素、硫代硫酸钠、磷酸氢二钠，均为化学纯购　调整ｐＨ值至８．０－４－０．１０，加入到细菌发酵罐中，　白北京奥博星生物科技有限公司。　ｌ１６℃高压蒸汽灭菌４０ｍｉｎ。　２４　・第７期２０１２年吉林畜牧兽医　专论综述・陋琵；；ｉ；．＿雪髂髂：：一　　１．４．２　生产用种子制备　３小结和讨论　按照《兽用生物制品规程》要求制备，经过检　３．１从培养菌数看，Ｉｌ号培养基高于Ｉ号培养基，　验合格后备用。　高出２３％，可以使用混合蛋白胨制备的培养基进　１．４－３菌液制备　行猪丹毒杆菌活疫苗的生产。　２从冻干存活率看，Ｉ号培养基略高于ＩＩ号培　按培养基总量的ｌ％～２％接入二级种子液，　３．采用发酵罐静止培养，在３７±０．１０￣Ｃ条件下培养，　养基，但二者无显著差别，均可达到冻干存活标　培养期问用灭菌后的２Ｎ氢氧化钠溶液调整ｐＨ　准。在冻干后检测头份上，均达到《兽用生物制　值至８．０±０．１０，培养２０　ｈ，取样纯粹检验并且测　品规程》标准，但在Ⅱ号培养基制备的菌液中加　入适量的离心后菌泥，就可以达到口服疫苗的标　定菌数，经检验合格后配苗分装冻干。　２试验结果　准。　３．３采用ＩＩ号培养基所使用的混合蛋白胨，使培　采用Ｉ号培养基和ＩＩ号培养基分别生产猪　养基中的氮源选择更加合理，弥补了各个厂家组　丹毒活疫苗各３批，生产和检验结果见表１。　成成分上的差异　表１　两种培养基生产疫苗的检验结果　３．４本次试验只　两种配方的比较，　还可以进一步通　过试验优化ＩＩ　号培养基中各　个蛋白胨的比　例。　参考文献（略）目　（四）建立考评责任制，加大督导检查力度　（上接第１８页）　动物标识及疫病可追溯体系建设工作是一项　信息的采集、录入和传输工作，充分利用春秋防　系统工程，既涉及到各级畜牧兽医行政管理部门，　疫和补免时机，认真做好牲畜耳标的佩戴、牲畜　又涉及到各级动物疫病预防控制中心、动物卫生　耳标信息的采集、录入和传输工作，禁止只免疫　监督所和畜牧总站，只有各部门密切配合，才能推　不佩戴耳标、只佩戴耳标不采集、录入和传输信　进追溯体系建设各项工作均衡开展。一是建立责　息或牲畜』临出栏时才佩戴耳标现象。二是在检　任制，将牲畜耳标的佩戴，信息的采集和传输，养　疫监督环节中切实建立区域联动机制，对进入流　殖、销售、收购和屠宰等环节的监督管理，以及规　通环节的牲畜，无论跨省运输还是省内调动，无　模饲养场、养殖小区的编码备案和养殖档案管理　论用途和去向如何，都要利用追溯设备对牲畜耳　等基础性工作，按照职能分工，细化追溯体系建设　标所载信息进行识读，凡未识读到相关信息的，　工作的责任和目标，并落实到具体单位，落实到人　一律不予放行并不得出具相关检疫合格证明，以　头，确保追溯体系建设的各项工作任务有序进行。　此推动防疫环节牲畜耳标信息采集、录入和传输　二是建立考核考评机制，将追溯体系建设各项工　工作的开展。三是在饲养环节中扎实做好辖区　作的开展情况纳入全年动物防疫工作考核之中，　内规模饲养场和养殖小区的编码备案和养殖档　重点考核各地牲畜耳标佩戴情况、追溯设备使用　案管理等基础性工作，准确掌握规模饲养场和养　管理情况、牲畜耳标信息采集和传输情况，以此推　殖小区畜禽的调出和补栏情况。　动全省追溯体系建设工作的开展。目