注射用氨苄西林钠氯唑西林钠质量评价

种类基本一致，但杂质含量及分布有较大差异。结论 注射用氨节西林钠氯哇西林钠质量总体较好，现行质量标准需进一步完 善。原料药的质量影响制剂质量，釆用不同生产工艺氨节西林钠原料药生产的样品质量存在明显差异，冻干氨节样品质量不及

结晶氨节样品，且更易受温度的影响。因此，应引导企业首选溶媒结晶工艺氨节西林钠原料。关键词：注射用氨节西林钠氯哇西林钠；质量；评价性抽验中图分类号：R97&1 文献标志码：AQuality assessment of ampicillin sodium and cloxacillin sodium for injectionLi Yi-lan, Zhou Xiao-xi, Yao Yu, Tian Fang, Zhang Ling-bian and Qin Ai-fang

(Shanxi Institute for Food and Drug Control, Taiyuan 030001)Abstract Objective To evaluate the suitability of the statutory and the quality of ampicillin sodium and

cloxacillin sodium for injection of different production processes. Methods According to the general requirements of national drug assessment programs, the statutory standard methods combined with exploratory researches were used to evaluate the quality of ampicillin sodium and cloxacillin sodium for injection. Results According to the statutory standards, 47 batches were examined and the qualified rate was 100%. The method of related substance test was optimized. This paper also researched the structures and sources of impurities. Exploratory research showed that all impurities were mainly from impurities in raw materials. The kinds of impurities from different batches of different production processes were roughly the same, but the distribution and the contents of them had greater differences. Conclusion The quality of ampicillin sodium and cloxacillin sodium was generally under good control. However, the quality control specification needs to be further improved. The quality of raw material affects the quality of ampicillin sodium and cloxacillin sodium. Studies have shown that the quality of freeze drying process sample is inferior to that of solvent crystallization process sample. Therefore, enterprises should be guided to choose the solvent crystallization process ampicillin sodium raw materials.Key words Ampicillin sodium and cloxacillin sodium for injection; Quality; Evaluative testing收稿日期：2018-11-20作者简介：李一兰，女，生于1984年，主管药师，主要研究方向为药物分析，E-mail: liyilanl218@163.com

.通讯作者：E-mail： zhouxiaoxill34@126.com第一作者：李一兰，毕业于温州医学院 药理学专业，硕士。主要从事抗感染抗肿瘤及

生化药品的检验检测及质量评价工作。多次参 与或承担国家药品评价性抽验工作，参与并完 成部分仿制药一致性评价复核匸作。n通讯作者：周晓溪，现任山西省食品药品检验所 化学药品检测二室主任，主任药师。1993年毕业于山西

大学，2006年获中国药科大学药物分析专业硕士学位。 长期从事抗生素药品检验及质量研究工作，多次主持完

成国家药品评价抽验工作、药品标准的制修订及复核工 作，在国家级核心期刊发表论文10余篇。.296.注射用氨节西林钠氯哇西林钠质量评价李一兰等注射用氨节西林钠氯哇西林钠为氨节西林钠和 2.1法定检验氯哇西林钠等量混合的无菌粉针剂，即对革兰阳性 本次抽验的样品按照国家药品标准化学药品地

菌和阴性菌有广谱杀灭作用，又对耐青霉素的金黄 色葡萄球菌有效17,适用于敏感菌所致的呼吸道感

染、胃肠道感染、尿路感染、软组织感染、心内膜

方标准上升国家标准第七册【91进行检验。主要检验项

目为水分、有关物质、含量测定等。2.2探索性研究根据法定检验结果，结合文献报道附。-⑴以及品 种特点、专题调研等情况，重点开展晶型、水分与

炎、脑膜炎、败血症等，也可用于化脓性链球菌或

肺炎球菌与耐青霉素葡萄球菌所致的混合感染。注

射用氨节西林钠氯哇西林钠均由无菌原料药直接分

水活度、有关物质等项目的探索性研究。装而成，规格为0.5g、l.Og、1.5g和2.0g。2.2.1晶型测定注射用氨节西林钠氯瞠西林钠为2016年国家评

价性抽验品种，此次抽验的目的在于客观地评价国 内药品的质量现状；客观分析产品存在的主要质量

选取不同生产工艺样品及原料，采用粉末X-射 线衍射测定晶型。2.2.2水分与水活度问题，进而为进一步提高产品质量指明方向W氨 分别将不同生产工艺的样品各2批次置于相对湿 度75%的环境中，开盖放置，取样时间为间隔2h,

节西林钠有溶媒结晶、冷冻干燥、喷雾干燥3种生

产工艺【叽氯哇西林钠为溶媒结晶生产工艺。依据

分别选用水分测定仪和温控水分活度仪测定其水分

氨茉西林钠原料的生产工艺，本次评价样品可分为 和25 °C水活度。2.2.3有关物质两种：溶媒结晶氨节西林钠样品与冷冻干燥氨节西

林钠样品，分别简称为结晶氨节样品与冻干氨茉样

(1) 有关物质测定：现行标准采用等度洗脱法，不能有效分离杂质，参照2015年版中国药典二部问

品。本文对国内市场上的注射用氨节西林钠氯哇西

林钠依据现行药品质量标准进行检验并进行探索性 研究，结合标准检验及探索检验结果对质量进行系

氨节西林钠方法建立本品有关物质梯度洗脱法：采 用十八烷基硅烷键合硅胶(4.6mmX250mm, 5|im)为

统地分析，从而对现行药品质量标准提出合理的改 填充剂；流动相A为12%乙酸溶液-0.2mol/L磷酸二 氢钾溶液-乙睛-水(0.5:50:50:900, V/V/V/V),流动相

B为12%乙酸溶液-0.2mol/L磷酸二氢钾溶液-乙膳-水

进建议，为注射用氨节西林钠氯哇西林钠质量标准 的进一步完善和今后的监督管理提供重要依据W

1仪器与试药(0.5:50:400:550, V/V/V/V}-,检测波长为254nm。先以 流动相A-流动相B(85:15,

等度洗脱，待氨节西林1.1仪器Waters E2695高效液相色谱仪；Mettler AE240

峰洗脱完毕后立即按表1进行线性梯度洗脱。电子天平；Mettler Toledo SevenMulti酸度计；

Mettler Toledo DL38水分滴定仪；温控水分活度仪 (Novasina, Awsprint)； Ultimate 3000 高效液相色谱

(2) 杂质的确证：通过UPLC-MS切换技术在线

脱盐，一维色谱条件参照有关物质测定，二维色

谱条件为色谱柱Acclaim™ Polar Advantage II Clg

仪系列；Thermo Scientific公司Q ExactiveFocus™组 合型四极杆OrbitrapTM质谱仪。(4,6mm X 50mm, 3gm)；流速：0.5mL/min；柱温:

30°C；流动相为水:乙睛=80:20(/9。利用质谱进行 杂质一级和二级扫描：根据二维上的出峰时间，设

置质谱阀切换参数，进行一级和二级扫描。质谱条 件：鞘气流速：40L/min；辅气流速：5L/min；反吹

1.2试药氨节西林对照品：批号130410-201207,含量

86.5%；氯哇西林对照品：批号130423-200903,

含量91.0%；氨苯西林系统适用性对照品：批号

气流速：lL/min；喷雾电压：3.5kv；毛细管温度：表1梯度洗脱程序130618-201202；均购自中国食品药品检定研究院。

45批次注射用氨节西林钠氯啤西林钠为2016年国家

药品评价性抽验样品(其中冻干氨莘样品43批次，结 晶氨节样品2批次)，另有2批次结晶氨节样品为调研 样品，分别抽自国内6家生产企业。水为自制超纯

水，乙膳为Dikma公司生产的色谱纯，其余所用试剂 均为分析纯。Tab. 1 Linear gradient elution programZ/min流动fflA/%流动相B/%030851500858510010045506015152实验方法中国抗生素杂志2019年3月第44卷第3期320°C；辅气加热温度：400°C；全扫描：分辨率： 35000；扫描范围：200-2000o2.2.4稳定性试验分别将不同生产工艺样品进行加速试验，在 40°C条件下分别放置10、20和30d,对溶液的澄清度

与颜色、含量、有关物质等进行测定。3结果与讨论3.1法定检验结果47批次样品按现行药品质量标准检验均符合规

定，合格率为100%。水分、有关物质等主要检查项目

与产品质量密切相关，因此对其结果进行统计分析。

3.1.1水分对47批次样品的水分数据进行统计分析，结晶氨节 样品为1.98%~2.02%,冻干氨节样品为2.35沧2.%,结

晶氨苯样品水分低于冻干氨节样品。3.1.2有关物质对47批次样品的总杂质数据（等度洗脱）进行统计

分析，结晶氨节样品总杂质量为0.54%〜0.63%,冻干

氨节样品总杂质量为1.34%〜2.07%,结晶氨节样品总

杂质量低于冻干氨节样品。3.2探索性研究3.2.1晶型测定结晶氨节西林钠原料具有多个特征衍射峰为结

晶型粉末，冻干氨节西林钠原料无特征衍射峰出现 为无定型粉末；氯喙西林钠原料为结晶型粉末。结 晶氨节样品均具有相应特征衍射峰，冻干氨节样品

仅呈现氯醴西林钠特征衍射峰（图Do3.2.2水分与水活度冻干氨节样品与结晶氨节样品8h水活度和水分

平均上升率均存在一定差异，结晶氨节样品8h水分 平均增长率1.15%/h,水活度平均增长率0.034/h； 冻干氨节样品8h水分平均增长率1.22%/h,水活度平①：结晶氨节样品；②：结晶氨节西林钠原料；③：冻干氨卡西林

钠原料；④：冻干氨节样品；⑤：氯哇西林钠原料

图1粉末X-射线衍射图Fig. 1 Powder X-ray diffraction.297.均增长率0.056/h；冻干氨节样品初始水活度明显低

于结晶氨节样品，8h时其水活度与结晶氨节样品一

致，其增长速率高于结晶氨节样品（图2）； —般认为

样品在水活度越小时质量越稳定，本次试验发现，

初始水活度低的冻干氨节样品稳定性次于初始水活

度高的结晶氨节样品，提示晶型对本品质量的影响

大于水活度的影响2。水活度/AW图2不同生产工艺样品水活度及水分测定结果比较图

Fig. 2 The comparison of water activity and water detennination

results in samples of different production processes3.2.3有关物质为了能够更好地反映样品的杂质谱，对现行标

准的有关物质测定方法进行改进，建立了洗脱能力 更强，分离效果更好的梯度洗脱法，与现行标准的

等度洗脱法（图3）比较，其洗脱能力更强，检出的杂 质总量更多（图4）。47批次样品杂质个数和杂质总量

均明显增加（杂质总量增加了 0.02%〜1.67%）。探索性研究结果表明，利用氨茱西林系统适用 性对照品、氯瞠西林杂质对照品及通过UPLC-MS切

换技术在线脱盐实现磷酸盐液相条件杂质的定性， 研究样品16个杂质（其中杂质3、9、15、16由UPLC-

MS确证）并结合原料药杂质检出情况和破坏性试验

对杂质结构及来源进行了归属（表2）。通过主成分自

身对照法计算各杂质含量，分析47批次样品的杂质 检出和分布情况（图5）。图5显示不同生产工艺样品均

能检出这9个杂质，其中编号为1（氨莘西林曝啤酸）、 5（氨节西林闭环二聚体）、6（未知杂质6）、9（氨茱西林

闭环三聚体）、15（6-氨基青霉烷酸氯醴西林酰胺）、

16（未知杂质16）为主要杂质，且各杂质平均含量均

大于0.1%；其中5号杂质为冻干氨节样品最大单个杂

质，16号杂质为结晶氨节样品最大单个杂质»4-,6>=样品生产工艺为无菌原料直接混合分装’结合原

料药和制剂杂质检出情况，制剂的杂质均与原料药及

其降解物一致，提示原料药的质量影响制剂质量。

3.2.4稳定性考察.298.注射用氨节西林钠氯哇西林钠质量评价李一兰等0.9000.0320.024< 0.0160.8000.7000.6000.5000.4000.00S0.3000.20010.0 20.0 30.0 40.0 //min50.0 60.0 70.0 80.00」000杂质编号图3注射用氨节西林钠氯膛西林钠有关物质等度洗脱典型图谱Fig. 3 Isocratic elution program system HPLC chromatogram of ampicillin sodium and cloxacillin sodium for injection in

图5不同生产工艺样品较大9个杂质平均含量比较图related substancesFig. 5 Thecomparisonof 9 impurities contents in ampicillin

sodium and cloxacillin sodium两种生产工艺的样品在40°C的条件下进行加速

0.0320.024< 0.016

试验⑷。比较样品中的特定杂质氨节西林闭环二聚 体，总杂质、氨节西林和氯啤西林纯度变化，发现

||

5冻干氨节样品的闭环二聚体、总杂质量均增加，氨 节西林纯度降低，氯哇西林纯度无明显变化；结晶

氨节样品闭环二聚体，总杂质、氨节西林和氯哇西

10.0

20.0

30.0 40.0 50.0 60.0 70.0林纯度无明显变化。提示冻干氨节样品受存储温度

影响较大，在存储过程中不稳定。//min图4注射用氨节西林钠氯哇西林钠有关物质梯度洗脱典里图谱

3.2.5相关分析将47批次样品的水分、氨节西林闭环二聚体、

Fig. 4 Gradient elution program system HPLC chromatogram

of ampicillin sodium and cloxacillin sodium for injection in

杂质总量、纯度检验结果和生产工艺类型等进行多因

素相关分析（见表3）表明：①不同氨茉西林钠原料生

related substances表2注射用氨节西林钠氯呼西林钠杂质的归属Tab. 2 The impurity ascription of ampicillin sodium and cloxacillin sodium for injection杂质编号

杂质名称

BP对应杂质

氨节西林杂质D杂质来源降解杂质和副产物1氨节西林曝畔酸未知杂质223-氨节西林杂质B氨节旖林杂质G氨节西林杂质M降解杂质工艺杂质厶氨节西林4562'5•- •酮哌嗪-2（R）氨节西林氨节西林闭环二聚体降解杂质降解杂质和副产物未矢口杂质6氯哇西林嚷哇酸-氯畔西林杂质A降解杂质降解杂质和副产物71011未知杂质8氨节西林闭环三聚体氨节西林开环一聚体-氨节西林杂质M氨节術林杂质M降解杂质降解杂质和副产物降解杂质和副产物未知杂质11未知杂质12--氯畔西林杂质D降解杂质降解杂质降解杂质降解朵质降解杂质1213143-（2-氯苯基）-5-甲基4异恶哇竣酸未知杂质14-氯哇術林杂质E1516注：“■”为无6-氨基青霉烷酸氯哇西林酰胺未知杂质16降解杂质中国抗生素杂志2019年3月第44卷第3期.299.考[J].中国抗生素杂志,2013, 38(1): 1-11.产工艺与样品的水分、氨节西林闭环二聚体、杂质总

量、氨节西林纯度等均显著相关(P<0.01),提示氨节

[4]

肖慧.李雪，罗嘉琳，等.国产头抱匹胺注射剂的质量分析

西林钠原料的生产工艺是影响本品质量的重要因素；

②样品的氨节西林纯度与水分、杂质总量等均显著相

[5]

[J].中国抗生素杂志,2018, 43(3): 35-42.郭艳娟，李伟，曹晓云，等.国产注射用头抱地嗪钠质量分 析[J].中国抗生素杂志,2018, 43(3): 291-295.关，提示水分亦是影响样品纯度变化的主要原因。[6] 周晓溪，李青翠，郭景文，等.注射用氨节西林钠质量研究

4小结[J].药物分析杂志,2011, 31(5): 875-878.本次评价性抽验结果显示，注射用氨节西林钠

氯呼西林钠总体质量较好，产品合格率100%,但

[7] 肖慧，洪建文，彭洁，等.国产注射用头抱西丁钠质量评价

[J].中国抗生素杂志,2017,42(6): 470-475.[8]

黄婕，滕饪，徐洪，等.国产氨节西林钠胶囊质量评价[J].

现行质量标准需进一步完善，建议采用梯度洗脱

的方法进行有关物质检查，并对氨节西林闭环二 聚体等特定杂质进行控制。探索性研究表明采用

不同生产工艺氨节西林钠原料药生产的样品质量

中国抗生素杂志,201& 43(3): 296-302.[9] 国家药典委员会.国家药品标准[S].化学药品地方标准上 升国家标准第七册：88-8.[10] 付晓丽，郭景文，郑台，等.注射用头抱尼西钠质量评价

存在明显差异，冻干氨节样品质量不及结晶氨节样

品，且更易受温度的影响，提示原料药的质量影响 制剂质量。因此，应引导企业首选溶媒结晶工艺氨

[J].中国抗生素杂志,2014, 39(4): 49-52.[11] 杜旭，曹晓云，郭福庆，等.国产注射用头抱替哇钠质量分

析[J].中国抗生素杂志,2017, 42(6): 34-38.节西林钠原料。参考文献[1]

王永红，杨云虹.氨节西林钠氯哇西林钠静脉滴注引起严

[12] 国家药典委员会.中华人民共和国药典[S], 2015年版二

部：1150.[13] 薛晶，尹力辉，邹文博，等.生产工艺对氨节西林钠质量的

影响[J].中国药学杂志,2011,46(23): 1833-1839.[14] 闻宏亮，裘亚，张含智，等.注射用氯哇西林钠的杂质谱研

究[J].中国药学杂志,2016, 51(6): 488-493.重过敏性休克1例救护体会[J].临床合理用药杂志，2012,

5(10B): 131-132.[15] 周晓溪，郭景文，郑台，等.国产注射用氨节西林钠杂质

谱与其生产工艺的相关性研究[J].药物分析杂志，2013,

[2] 张利斌，张晓庆，刘明忠.注射用氨节西林钠/氯哇西林钠 与不同溶媒配伍稳定性的研究[J].药学实践杂志，2006,

33(3): 486-4.[16] 牛长群，祝仕清.氨节西林、阿莫西林中相关物质的

LC-MS分析[J].药学学报,2011, 36(10): 758-761.24(2): 86-.[3]

胡昌勤.对抗生素药品评价性抽验基本思路与方法的思表3主要项目检测结果多因素相关分析Tab. 3 Multi-factors correlation analysis of the maior items determination results生产工艺水分氨节西林闭环二聚体杂质总量氨节西林纯度氯哇西林纯度生产工艺Pearson相关性显著性(双侧)1*-0.8240.000**-0.8030.00045**-0.5880.0000.443\"0.0020.1970.194N水分4545450.2240.139454545-0.1170.445Pearson相关性显著性(双侧)-0.824 *0.0004510.548\"*-0.3360.0240.0004545N氨节西林闭环::聚体Pearson相关性4545**-0.8030.0000.548\"0.0004510.877\"0.000*-0.3680.013*-0.3440.021显著性(双侧)N杂质总量45**-0.5880.00045**0.8774514545-0.257Pearson相关性显著性(双侧)0.2240.13945*-0.3570.0160.000450.0N氨节西林纯度450.443\"4545145Pearson相关性显著性(双侧)*-0.3360.024*-0.3680.01345*-0.3570.016-0.2330.1240.00245N氯畔西林纯度454545-0.2330.12445Pearson相关性显著性(双侧)0.1970.19445-0.1170.445*-0.344-0.2570.010.02145N45454545注：“••” ：在0.01水平(双侧)上显著相关：“•”：在0.05水平(双侧)上显著相关