亳紫菀不同药用部位有效成分含量比较与分析

第３１卷第４期　２０１４年８月　甘肃中医学院学报　Ｊ．ＧＡＮＳＵ　ＣＯＬＬＥＧＥ　ＯＦ　ＴＣＭ　Ｖｏ１　３　Ｊ　Ｎｏ．４　Ａｕｇ．２０１４　亳紫菀不同药用部位有效成分含量比较与分析　夏成凯　，程（１．毫州职业技术学院，安徽毫州磊　，李静　，汪电雷　亳州２３６８００；　２３６８００；２．毫州市食品药品检验所，安徽３．安徽中医药大学，安徽合肥２３０００１）　摘要：目的　比较亳紫菀药材不同药用部位紫菀酮的含量。方法　采用薄层色谱（ＴＬＣ）法对亳紫菀的　不同药用部位进行定性鉴别，采用高效液相色谱（ＨＰＬＣ）法对不同药用部位紫菀酮的含量进行测定。结果　ＴＬＣ分析亳紫菀根状茎、根、母根均在相应的Ｒｆ值处显相同颜色的荧光斑点，且阴性无干扰；ＨＰＬＣ法所　测紫菀酮含量大小依次为根＞母根＞根状茎，所测精密度、稳定性、重复性及加样回收率均良好。结论法简便、准确、分离度好，为亳紫菀的产地加工提供了依据。　关键词：亳紫菀；紫菀酮；薄层色谱；高效液相色谱　中图分类号：Ｒ２８４．２文献标志码：Ｂ文章编号：１００３－８４５０（２０１４）０４－００３０—０３　该方　紫菀（Ａｓｔｅｒ　ｔａｔａｒｉｅｕｓ　Ｌ．ｆ．）为菊科多年生草本植　粗粉碎（过３号筛）１　ｇ，加甲醇２５　ｍＬ，超声处理　物紫菀的根状茎¨　。《中华本草》称紫菀主产于安　徽毫州、涡阳（紫菀的主产区与地道产区，故称为　“毫紫菀”）及河北安国　。其性味辛、甘、苦、温，归　肺经，具有祛痰、镇咳、抗菌、抗癌等作用，主治气逆　咳嗽、吐痰不利、肺虚久咳、痰中带血等症　。紫菀　酮是紫菀的主要有效成分，为了明确不同药用部位　紫菀酮的含量，规范药农的产地加工，本文采用薄层　色谱（ＴＬＣ）法对毫紫菀的不同药用部位进行定性鉴　别，采用高效液相色谱（ＨＰＬＣ）法对不同药用部位　紫菀酮的含量进行测定　１仪器与材料　１．１　仪器　３０　ｍｉｎ，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯１　ｍＬ使其　溶解，作为供试品溶液。另取紫菀酮对照品，加乙酸　乙酯制成每１　ｍＬ含１　ｍｇ的溶液，作为对照品溶液。　按照２０１０年版《中国药典》（一部）薄层色谱法（附录　ⅥＢ）试验，吸取上述２种溶液各３　，分别点于同一　硅胶Ｇ薄层板上，以石油醚（６０～９０）℃一乙酸乙酯　（９：１）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以１０％硫酸乙　醇溶液，加热至１０５℃，分别置日光和紫外光灯　（３６５　ｎｍ）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相　应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。结果见图１。　，为毫紫菀的产地加工　及资源的综合利用提供理论基础。　Ｗａｔｅｒｓ　ｅ２６９５型高效液相色谱仪，２９９８型紫外　检测器，Ｅｍｐｏｗｅｒ工作站，Ｇ硅胶板（薄层层析用）。　１．２材料　紫菀酮对照品（２０１３年１０月购于中国食品药　品检定研究院，批号２０１３１００２），乙腈（色谱纯），蒸　馏水，其他试剂均为分析纯。　亳紫菀对照药材（２０１２年１１月采于安徽省亳　州市十九里镇小刘庄紫菀药材基地，批号　２０１２１１０５），由安徽中医药大学教授、毫州职业技术　学院院长方成武教授鉴定为紫菀。　２方法与结果　豁；《　４　５　】紫菀母根部；２紫菀根部；３紫菀根状茎；　４紫菀酮对照品；５阴性对照　图１紫菀不同药用部位ＴＬＣ图　２．１薄层鉴别　分别取已经分离为根状茎、根、母根的紫菀药材　收稿日期：２０１３—１１—１４　基金项目：安徽省教育厅自然科学基金资助项目（ＫＪ２０１１Ｚ２６０），安徽省高等学校省级优秀青年人才基金项目（２０１２ＳＱＲＩ２５０）　作者简介：夏成凯（１９８２－），男，讲师，医学硕士。研究方向：中药质量控制。　３Ｏ—　第３１卷第４期　２０１４年８月　甘肃中医学院学报　Ｊ．ＧＡＮＳＵ　ＣＯＬＬＥＧＥ　０Ｆ　ＴＣＭ　ＶｏＪ．３ｌ　Ｎｎ４　Ａｕｇ．２０１４　２．２含量测定　量浓度为０．１　１　ｍｇ／ｍＬ的溶液，作为对照品溶液。　２．２．３供试品溶液制备分别称取已经分离为根　２．２．１色谱条件　色谱柱采用Ｃ　。一ＡｇｉｌｅｎｔＨＣ　（４．６　ｍｍ×２５０　ｍｍ，５　ｍ），流动相为乙腈一水（９６：　４），检测波长为２００　ｎｍ，柱温为４０℃，流速为　状茎、根、母根的紫菀药材粗粉（过３号筛）约１　ｇ，　精密称定，置５０　ｍＬ具塞锥形瓶中，精密加入甲醇　２０　ｍＬ，称定质量，４０℃温浸１　ｈ，超声处理（功率　２５０　Ｗ，频率４０　ｋＨｚ）１５　ｍｉｎ，取出，放冷，再称定质　量，用甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过，取续滤液，　即得。紫菀不同药用部位ＨＰＬＣ图见图２。　１．０　ｍＬ／ｍｉｎ，理论塔板数按紫菀酮峰面积计应不低　于３　５００。　２．２．２对照品溶液的制备精密称取紫菀酮对照　品５．５　ｍｇ，加乙腈适量溶解，定容至５０　ｍＬ，制成质　暮（）．ｔＪ６０　０・（）５０　【１．（埘０　０・（）３（）　主（）．（）８　（）－（）６　０．０４　（）．（Ｊ２０　（）．（）２　（）・（）ｌ｛｛）　（）　）　０．０Ｏ　Ａ紫菀酮对照品；Ｂ根状茎；Ｃ母根；Ｄ根　图２紫菀不同药用部位ＨＰＬＣ图　２．２．４　线性关系考察　精密吸取质量浓度为　０．１１　ｍｇ／ｍＬ的紫菀酮对照品溶液２，４，６，８，１０，　２０　Ｌ，在上述“２．２．１”项下色谱条件下进样，测定　峰面积值，以进样量为横坐标，峰面积为纵坐标，得　回归方程为：Ｙ＝１１０　７７０Ｘ－１６４　０００，相关系数ｒ＝　０．９９９　８。结果表明，紫菀酮量在０．０６８～４．６６０　ｇ　范围内呈良好的线性关系。　ＲＳＤ值为１．９％（　＝６），表明样品在２４　ｈ内稳定。　２．２．７重复性试验取“２．２．３”项下已制备的根　状茎供试品溶液，按照“２．２．１”项下色谱条件平行　测定５次，每次进样２Ｏ　，测定峰面积，根据峰面　积结果计算ＲＳＤ值为２．０５％（ｎ：５）。说明重复性　良好。　２．２．８加样回收率试验取已知含量的紫菀根状　２．２．５　精密度试验　精密吸取质量浓度为　０．１１　ｍｇ／ｍＬ的对照品溶液，按照“２．２．１”项下色谱　茎样品约０．５　ｇ，共５份，精密称定，分别精密加入紫　菀酮对照品适量，按照“２．２．３”项下供试品的制备　方法制备供试品溶液５份，按照“２．２．１”项下色谱　条件测定，得到平均回收率为９８．０４％，ＲＳＤ值为　１．８６％（ｎ＝５）。结果见表１。　条件连续进样５次，每次进样２０　Ｌ，记录峰面积，　计算紫菀酮峰面积的ＲＳＤ值为１．０２％，表明仪器的　精密度良好。　２．２．６稳定性考察取“２．２．３”项下已制备的根　状茎供试品溶液，按照“２．２．１”项下色谱条件，分别　在０，２，４，６，８，１２　ｈ进样２０　Ｌ，测定峰面积，计算　２．２．９　亳紫菀不同药用部位样品测定　分别取　“２．２．３”项下亳紫菀不同药用部位供试品溶液　２０　ｔｘＬ，按照“２．２．１”项下色谱条件测定。根据峰面　３１—　第３１卷第４期　２０１４年８月　甘肃中医学院学报　Ｊ．ＧＡＮＳＵ　ＣＯＬＬＥＧＥ　ＯＦ　ＴＣＭ　Ｖｏ１．３１　Ｎｏ．４　Ａｕｇ．２０１４　ｌ　０．５０３　５　０．５０２　８　０．５０４　５　０．４９８　６　０．５０１　５　１．００７　０　１．００５　６　１．００９　０　０．９９７　２　１．Ｏ０３　０　０．５０２　２　０．５０２　２　０．５０２　２　１．５２３　１　１．４６３　１　１．４８３　５　１．４７０　２　１．４４５　４　１００．９２　９７．０４　２　３　４　５　９８．１７　９８．０５　９６．０３　９８．０４　１．８６　０．５０２　２　０．５０２　２　积计算紫菀酮的含量。由表２可见亳紫菀不同药用　部位主要成分紫菀酮的含量由大到小依次为根＞母　根＞根状茎。结果见表２。　表２紫菀不同药用部位紫菀酮含量　含量由大到小依次为根＞母根＞根状茎。因此该方　法为传统的产地加工毫紫菀时是否除去有节的根茎　（习称“母根”）及除去后的母根是否作为废弃物处　理等提供必要的依据。通过对毫紫菀各药用部位进　行含量测定，结果发现产地加工时除去的母根含量　较高，因此建议除去的母根可以进一步利用。　参考文献：　『１］中华人民共和国药典委员会．中国药典（一部）［Ｍ］．北　京：中国医药科技出版社，２０１０：３２２．　『２］牛倩，王德群，刘耀武．亳州栽培药材的历史变迁［Ｊ］．安　徽医药，２０１０，１４（２）：２３２—２３４．　３讨论　［３］修彦风，程雪梅，刘蕾，等．不同紫菀饮片中紫菀酮比　较［Ｊ］．上海中医药大学学报，２００６，２０（２）：５９—６１．　亳紫菀的各药用部位（根状茎、根、母根）通过　ＴＬＣ法分析其均在相应的Ｒｆ值处显相同紫色的荧　光斑点。此方法简便、重现性良好，可以用于毫紫菀　［４］房慧勇，单高威，秦桂芳．等．紫菀的化学成分及其药理　活性研究进展［Ｊ］．医学研究与教育，２０１２，２９（５）：７３—　７７．　药材的定性鉴别。　采用ＨＰＬＣ法对亳紫菀各药用部位（根状茎、　根、母根）进行含量测定，结果其主要成分紫菀酮的　［５］吴瞍，王国艳，谷丽华，等．ＨＰＬＣ法测定紫菀中紫菀酮含　量［Ｊ］，中国中药杂志，２００３，２８（８）：７３８—７４０．　［编辑：陈正君］　Ｔｈｅ　ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ　ａｎｄ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ａｂｏｕｔ　ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ　ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｐｏｓｉｔｉｏｎｓ　ｉｎ　Ｒａｄｉｘ　ａｓｔｅｒｉｓ　ｉｎ　Ｂｏｚｈｏｕ　Ｘｉａ　Ｃｈｅｎｇｋａｉ　，Ｃｈｅｎｇ　Ｌｅｉ　，Ｌｉ　Ｊｉｎｇ　，Ｗａｎｇ　Ｄｉａｎｌｅｉ　（１．Ｂｏｚｈｏｕ　Ｖｏｃａｔｉｏｎａｌ　ａｎｄ　Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ　Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｂｏｚｈｏｕ　２３６８００，Ｃｈｉｎａ；　２．Ａｎｈｕｉ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　ＴＣＭ，Ｈｅｆｅｉ　２３０００１，Ｃｈｉｎａ；　３．Ｂｏｚｈｏｕ　Ｆｏｏｄ　ａｎｄ　Ｄｒｕｇ　Ｉｎｓｐｅｃｔｉｏｎ　Ｏｆｆｉｃｅ，Ｂｏｚｈｏｕ　２３６８００，Ｃｈｉｎａ）　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｃｏｍｐａｒｅ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｓｈｉｏｎｏｎｅ　ｉｎ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｐａｒｔｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｍｅｄｉｃｉｎａｌ　ｍａｔｅｒｉａｌｓ　ｏｆ　Ｒａｄｉｘ　０ｓｔｅｒｉｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　ＴＬＣ　ｗａｓ　ｕｓｅｄ　ｔｏ　ｉｄｅｎｔｉｆｙ　ｔｈｅ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｍｅｄｉｃｉｎａｌ　ｐａｒｔ　ｏｆ　Ｒａｄｉｘ　ａｓｔｅｒｉｓ．ＨＰＬＣ　ｗａｓ　ｕｓｅｄ　ｔｏ　ｍｅａｓｕｒｅ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｓｈｉｏｎｏｎｅ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｂｙ　ＴＬＣ，ｒｈｉｚｏｍａ，ｒｏｏｔ　ａｎｄ　ｍｏｔｈｅｒ　ｒｏｏｔ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈｅ　ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ　ｓｐｏｔｓ　ｉｎ　ｓａｍｅ　ｃｏｌｏｒ　ｗｉｔｈ　ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ　ｏｆ　Ｒａｄｉｘ　ａｓｔｅｒｉｓ　ａｎｄ　ｈａｄ　ｎｏ　ａｎｙ　ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅ．Ｂｙ　ＨＰＬＣ，ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｓｈｉｏｎｏｎｅ　ｗａｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｆｏｌ—　ｌｏｗｉｎｇ　ｄｅｃｒｅａｓｉｎｇ　ｏｒｄｅｒ：ｒｏｏｔ，ｍｏｔｈｅｒ　ｒｏｏｔ，ｒｈｉｚｏｍａ．Ｔｈｅ　ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ，ｓｔａｂｉｌｉｔｙ，ｒｅｐｅａｔａｂｉｌｉｔｙ　ａｎｄ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｗｅｒｅ　ａｌｌ　ｇｏｏｄ．　Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｔｈｉｓ　ｍｅｔｈｏｄ　ｉｓ　ｓｉｍｐｌｅ，ｃｏｎｖｅｎｉｅｎｔ　ａｎｄ　ａｃｃｕｒａｔｅ，ａｌｓｏ　ｉｎ　ｈｉｇｈ　ｅｆｉｃｉｅｎｃｙ　ｏｆ　ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ．Ｉｔ　ｃａｎ　ｂｅ　ｆｕｒｔｈｅｒ　ｆｕｓｅｄ　ｉｎ　ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ　Ｒａｄｉｘ　ａｓｔｅｒｉｓ　ｉｎ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｐｌａｃｅ．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｒａｄｉｘ　ａｓｔｅｒｉｓ：ｓｈｉｏｎｏｎｅ；ＴＬＣ；ＨＰＬＣ　３２－－－——