浅析动物源细菌抗生素耐药性的现状与对策

・５８・　中国兽药杂志　２０１２，４６（４）：５８—６１／周炜，等　浅析动物源细菌抗生素耐药性的现状与对策　周炜，陈慧华，周芷锦，鲁马媚，穆琳，应永飞　（浙江省兽药监察所，杭州３１００２０）　［收稿日期］２０１２—０２—０６［文献标识码］Ａ［文章编号］１００２—１２８０（２０１２）０４—００５８—０４［中图分类号］￥８５２．６　［摘要］　抗生素的滥用使细菌耐性问题日趋恶化，从细菌耐药性的定义、耐药机理及危害出发，简　要阐述和分析了动物源细菌抗菌药物耐药性的现状及对策，并简述我国动物源细菌耐药性研究进展。　［关键词］　细菌；抗生素；抗生素耐药性　Ｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｙ　Ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ　Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ｉｎ　Ｂａｃｔｅｒｉａ　ｏｆ　Ａｎｉｍａｌ　Ｏｒｉｇｉｎ　ＺＨＯＵ　Ｗｅｉ，ＣＨＥＮ　Ｈｕｉ—ｈｕａ，ＺＨＯＵ　Ｚｈｉ—ｊｉｎ，ＬＵ　Ｍａ—ｍｅｉ，ＭＵ　Ｌｉｎ，ＹＩＮＧ　Ｙｏｎｇ—ｆｅｉ　（Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｏｆＶｅｔｅｒｉｎａｒｙ　Ｄｒｕｇ　Ｃｏｎｔｒｏｌ　ｏｆＺｈｅｊｉａｎｇ　Ｐｒｏｖｉｎｃｅ，Ｈｏｎｇｚｈｏｕ　３１００２０，Ｃｈｉｎａ）　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｃｕｒｒｅｎｔｌｙ，ｔｈｅ　ａｂｕｓｅ　ｏｆ　ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ　ｃａｕｓｅｄ　ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ｂｅｃｏｍｅ　ｍｏｒｅ　ａｎｄ　ｍｏｒｅ　ｓｅｒｉｏｕｓｌｙ，ｗｅ　ｉｎｔｒｏｄｕｃｅｄ　ｔｈｅ　ｄｅｆｉｎｉｔｉｏｎ，ｍｅｃｈａｎｉｓｍ　ａｎｄ　ｈａｒｍ　ｏｆ　ｔｈｅ　ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ｆｉｒｓｔｌｙ，ａｎｄ　ｔｈｅｎ　ｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｙ　ａｎａｌｙｚｅｄ　ｔｈｅ　ｐｒｅｓｅｎｔ　ｓｉｔｕａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｃｏｕｎｔｅｒｍｅａｓｕｒｅｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ｉｎ　ｂａｃｔｅｒｉａ　ｏｆ　ａｎｉｍａｌ　ｏｒｉｇｉｎ，ａｎｄ　ｓｕｍｍａｒｉｚｅｄ　ｔｈｅ　ｐｒｏｇｒｅｓｓ　ｏｆ　ｉｔｓ　ｓｔｕｄｉｅｓ　ｉｎ　Ｃｈｉｎａ．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：ｂａｃｔｅｒｉａ；ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ；ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　２０１０年，一种可抗绝大多数抗生素的超级细菌　在英国、美国印度等国家爆发，一度引起全球性恐　医药品监察所开展了对华东地区鸡源和猪源性大肠　慌。一时间，亚洲国家对抗生素的不正当使用，成　为众矢之敌。尽管尚无明确证据表明人源细菌耐　药性来源于动物源细菌，但公众已然将矛头直指兽　用抗生素的滥用。当前形式下，如何正确地认识并　了解动物源细菌耐药问题已然成为关系到人类自　身安全和畜牧业健康发展的重要问题。　１９４０年，青霉素刚开始投入临床时的药敏实验　显示，所有金黄色葡萄球菌（简称“金葡菌”）均对　其敏感。自１９４２年，Ｒａｍｅｌ—ｋａｍｐ和Ｍａｘｏｎ首次　报道出现对青霉素耐药的金黄色葡萄球菌后¨　，科　学界就对细菌耐药性形成机制、耐药性监测等诸多　问题进行了深入研究。基于对人类自身安全及我　及沙门氏菌的耐药性背景调查。２００８年我国开始建　立了由中国兽医药品监察所、辽宁、上海、四川、广东　省（市）兽药监察所和中国动物卫生与流行病学中心　组成的动物源细菌耐药性监测系统，３年间主要开展　了对大肠杆菌、沙门氏菌对１４种抗菌药物敏感性的　研究，并已取得初步进展。本文简要介绍了细菌耐　药性的形成与传播途径，就动物源细菌耐药性的现　状及危害问题，提出了几点针对性建议，并简要总结　了我国动物源细菌耐药性研究的进展。　１细菌耐药性形成与传播　细菌耐药性又称细菌抗药性，系指细菌对于化　疗药物作用的耐受性，耐药性一旦产生，药物的化　疗作用就明显下降。　国畜牧业的健康发展因素的考虑，我国于２０世纪　９０年代就开始了对动物源细菌耐药性的研究，主要　针对重点养殖区的动物源大肠杆菌、沙门氏菌、金　黄色葡萄球菌和链球菌的耐药性。２０００年中国兽　耐药性根据其发生原因可分为天然耐药和获　得性耐药。天然耐药又称固有耐药，不是通过细菌　基因的改变，而是由于细菌自身独特的细胞表面结　构、对化学药物具有特殊的代谢或流出途径、对化　作者简介：周炜，博士，从事兽药及畜产品质量安全检测工作。　通讯作者：陈慧华。Ｅ—ｍａｉｌ：ｚｊｘｍｃｈｈ＠１６３．ｔｏｍ　２０１２，４６（４）：５８～６１／周炜，等　中国兽药杂志　・５９・　学药物降解酶具有特殊的生物合成途径等因素而　形成的对抗生素的天然耐药　Ｊ。例如大肠杆菌　和沙门氏菌由于其细胞膜具脂多糖厚的特点，而对　大环内酯类药物具有天然耐药。获得性耐药，则是　细菌通过基因突变或水平基因转移而获得。当长　优胜劣汰的自然选择下，突变优势通过亲代与子代　菌株之间的垂直传播得以几何倍增。　水平传播则又可分为转化、接合和转导三　种　。转化发生在一些链球菌、弯曲杆菌上，这些　细菌可从环境中摄取由死菌体细胞释放出来的游　离的耐药ＤＮＡ片断，这些ＤＮＡ片断在内化后，可　整合到受体染色体上，也可作为染色体ＤＮＡ自我　期应用抗生素时，占多数的敏感菌株不断被杀灭，　耐药菌株则大量繁殖，代替敏感菌株，而使细菌对　该种药物的耐药率不断升高。　耐药性细菌可从人、动物和食品中分离得到，　因而细菌耐药又可分为动物源、食源和人源三种。　２０１１年５月～７月在德国、西班牙、法国等欧盟国　家爆发的肠出血性流行病就是食源致病菌一肠出　血性大肠杆菌（ＥＨＥＣ）和肠黏附性大肠杆菌　（ＥＡＥＣ），经德国斯特大学的研究小组研究发现，这　两种致病菌对所有种类的青霉素及头孢菌素均有　耐药性。值得注意的是，动物源细菌耐药并非指耐　药菌株的耐药基因来源于动物源细菌，而系指从动　物体内、体表分离得到的菌株具有耐药性。　１．１　细菌耐药性的形成机制　抗菌药物产生抗菌　作用的两个必要条件是：抗菌药物的有效作用浓　度、抗菌药物与作用靶位的结合。因而微生物耐药　的作用机制可分为分为细菌酶对抗生素进行修饰　使其失活、减少抗生素进入、增加抗生素流出　－７］　以及改变或置换抗菌药物作用靶位等机制。　抗生素的失活与修饰是细菌通过获得编码水　解或修饰抗生素的酶的基因而产生的耐药性，迄今　为止，已发现并证实细菌中存在１９０多种Ｂ一内酰　胺酶，可以破坏青霉素或其它Ｂ一内酰胺酶类抗生　素　。有研究表明，２０１０年引起全球性恐慌的超　级细菌就是因其形成了编码新德里金属蛋白酶一１　（Ｎｅｗ　Ｄｅｌｈｉ—Ｍｅｔａｌｌｏ一１，ＮＤＭ一１）的基因，能对多　种抗生素进行修饰。减少抗生素进人类耐药主要　是细菌通过改变细胞膜通道蛋白或改变膜（荚膜、　外膜等膜结构）的理化性状而获得的耐药性。因流　出系统而获得的耐药则较为复杂，主要作用机制是　通过质子力或ＡＴＰ水解泵出膜通道两种，此类耐药　与天然耐药性及多重耐药性有关。抗菌药物作用　靶位的改变或置换主要与细菌内基因改变有关，如　ＧｙｒＡ基因突变导致氟喹诺酮类药物与作用靶位结　合率降低而形成的耐药＿９　Ｊ。　１．２细菌耐药性的获得与传播细菌主要通过基　因突变及水平基因转移两种方式获得耐药性，获得　的耐药性又可通过垂直和水平传播两种途径进行　传播。基因突变（ＤＮＡ／ＲＮＡ的突变）是细菌在外　因的诱导下自发进行的。尽管发生频率较低，但在　复制。接合是耐药基因片段以自动转移质粒或可　移动质粒为载体由供体菌向受体菌转移的过程，而　转导则是以噬菌体介导转移。水平传播可能发生　在不同菌属之间。这些质粒、整合子或转座子常携　带多个耐药性标记，大质粒常传递多种耐药性机　制，形成多重耐药　。　２动物源细菌耐药性的危害　大量研究表明，１７００多种感染性微生物中近　５０％是动物源性的¨　。同时，与人源性耐药菌相　比，动物源病原菌耐药谱广、耐药强度强，因而动物　源细菌耐药性危害性更强。　国际上对动物源细菌耐药危害性的调查研究可　上溯到２０世纪６０年代。１９６９年英国联合委员会　（ＵＫ　Ｊｏｉｎｔ　Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ）发布了Ｓｗａｎｎ报告，警告食品　动物使作亚治疗剂量抗菌药物用作促生长剂造成的　耐药菌可能危及人类健康。自此，诸多发达国家开　始着手对动物源细菌耐药性进行监测及流行病学调　研　。１９９７年日本发生了引起人们极大恐慌的Ｏ　大肠杆菌风波及沙门氏杆菌食物中毒事件，后经证　实与动物源致病菌的耐药性有关，动物源细菌耐药　性对人类健康的直接危害首次得以确认　。　３动物源细菌耐药性的检测方法　目前，动物源细菌耐药性的研究方法主要依据　临床和实验室标准化委员会（Ｃｌｉｎｉｃａｌ　ａｎｄ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　Ｓｔａｎｄａｒｄｓ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，ＣＬＳＩ）制订的《动物源细菌的抗　微生物药物纸片扩散法和稀释法敏感度试验执行　标准；认可标准——第三版》进行体外细菌培养药　敏性试验。纸片扩散法是将含有抗生素的纸片贴　于接种了被检菌的琼脂平板表面，在培养一定时间　后测量抑菌圈直径，因不同直径处药物浓度无法准　确测定，故主要作为定性试验。肉汤稀释法和琼脂　稀释法的检测原理相似，都是向培养基中加入已知　浓度的特定抗生素，用以确定最低抑菌浓度　（Ｍｉｎｉｍｕｍ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ，ＭＩＣ），因而可作　为半定量分析。Ｅ—Ｔｅｓｔ作为一种改良型纸片扩散　法，是将一定浓度梯度的抗生素附着于薄膜试纸　上，因而能根据开始出现抑菌圈的试条位置确定　ＭＩＣ。根据ＣＬＳＩ的解释，上述四种药敏检测方法仅　・６Ｏ・　中国兽药杂志　２０１２，４６（４）：５８～６１／周炜，等　限于标签范围内使用的治疗性抗菌药物，对于预防　及促生长用的抗菌药物、抗菌药物标签外使用（诸　如：改变用药范围、使用剂量、给药途径等使用情　况），因其使用效果与体外药敏试验结果的关联度　无法评估，而不适用。　近年来，随着基因技术的发展，聚合酶链式反　应（Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ　Ｃｈａｉｎ　Ｒｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）、基因芯片等　针对特定耐药基因片段的研究正逐步兴起，突破了　常规方法对被检菌生长速度的这一技术瓶颈，　为耐药菌分型、耐药性基因的溯源研究提供了技术　平台，但亦存在只能检测已知耐药基因、基因与表　型不一致造成假阳性等局限性。　由于以上检测均为被检菌的体外药敏试验，因　而依然存在假性耐药和假性敏感的可能，假性耐药　即　Ｊ：有些抗菌药在体外药敏试验呈耐药，但在被　检菌宿主体内仍具抗菌活性的现象；假性敏感即：　某一特定抗菌药物在体外试验中对某些确定的细　菌有抑菌或杀菌活性，但在临床治疗上是无效的，　例如第一代和第二代头孢菌素和氨基糖苷类对沙　门氏菌Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ　ｓｐｐ．均呈现假性敏感¨　。　４　动物源细菌耐药性的现状及发展趋势　随着规模化、集约化养殖的迅猛发展，畜禽养　殖业对抗生素的过度依赖，致使了细菌耐药性问题　１３趋严重。与此同时，由于存在“耐药性出现一过　量使用或滥用抗菌药物一耐药谱或耐药水平加重”　这一恶性循环¨　，致使动物源细菌耐药性问题不　断恶化。就全球范围而言，动物源细菌耐药性总体　表现出如下几大特点：　４．１　细菌耐药性产生迅速　目前，国际上新兽药　的研发期平均为１０年，而细菌产生耐药性仅需２　年。１９４０年，青霉素刚开始投入临床时的药敏实验　显示，所有金黄色葡萄球菌均对其敏感。１９４２年，　Ｒａｍｅｌ—ｋａｍｐ和Ｍａｘｏｎ报道出现对青霉素耐药的　金葡菌，其实际出现时间应为１９４１年。１９８４年氧　氟沙星上市不久，美国、法国、德国、日本等国家就　报道有耐药菌株出现。安普霉素在兽医临床上使　用不到两年就出现耐药大肠杆菌、沙门杆菌　。　４．２　多重耐药性上升　宋立等　对３２６株２０世　纪７０年代至本世纪初分离保存的大肠杆菌对氨苄　西林、庆大霉素等２Ｏ种抗生素的耐药性进行了试　验，结果表明：７０年代大肠杆菌耐药１～７种，８０年　代的则耐１～９种，而９０年代９０％以上的大肠杆菌　耐４～１１种，到２０００年９６％的大肠杆菌则能耐８—　１６种。潘志明等¨　对１９６２～１９９８年间分离保存　的３２５株鸡白痢沙门氏杆菌进行耐药性测定，发现　其耐药谱不断增宽，７０年代四耐、五耐菌株居多，８０　年代五耐、六耐、七耐菌株占绝大多数，９０年代七耐　以上菌株比例近９０％。　４．３耐药强度不断增强细菌耐药性另一重要指　标就是耐药菌株的ＭＩＣ。随着耐药性的产生，养殖　户盲目加大用药量，促使致病株耐药强度不断增　加。敏感型大肠杆菌对喹诺酮类药物（氧氟沙星）　的ＭＩＣ≤２　Ｉ￣ｇ／ｍＬ　１４１，雷连成等分离得到ＭＩＣ为　２５６　ｇ／ｍＬ鸡致病性大肠杆菌¨　。　４．４耐药性传播速度加快２０世纪６０年代首次　发现耐甲氧西林金黄色葡萄球菌，８０年代这一菌系　便遍布全球。如今，随着全球交通、物流的大发展，　使得耐药菌株耐药性的传播速度不断提高。２００７　年耐碳青霉烯肺炎雷伯氏菌在美国弗吉尼亚州爆　发，至２０１０年，该耐药菌便在巴西、以色列等国相　继爆发。　５动物源细菌耐药问题的对策　５．１　正确认识细菌耐药性　就整体而言，我国畜　牧业从业人员素质不高，对如何科学、合理使用抗　菌药物缺乏相应的专业技术知识。由于兽医临床　和饲料添加剂中抗生素用量、种类、范围不断增加　和扩大导致动物源性细菌耐药问题１３趋恶化，加之　一些兽医和饲料添加剂生产商非法使用或添加仅　限于人用的抗生素，进一步加重了动物源细菌耐药　性对人类健康的威胁。因而，首先必须加强广大畜　牧业从业人员及相关管理人员对动物源细菌耐药　问题的严重性和紧迫性的认识，从源头上减少耐药　性产生的条件。　在经历了耐药菌恶性爆发的事件后，细菌的耐　药性已有让人谈虎色变之嫌。但是，事物均有两面　性，我们在看到细菌耐药问题严重性的同时，还应当　从另外两个方面正确认识细菌耐药性。①微生物产　生耐药性并非都是坏事，如人体内正常菌丛，其产生　的耐药性在保护自身的同时，也能确保不易发生菌　群失调，不给真菌等条件致病菌以可乘之机。②并　非所有抗生素均会迅速产生耐药性。临床上，根据　抗微生物药物发生耐药性的可能性，抗生素可分为　高耐药可能性药物和低（或无）耐药可能性药物　，　前者临床应使用，如氨苄西林、庆大霉素、四环　素、环丙沙星；后者临床可不或优先使用，如阿　米卡星、多西环素、头孢吡肟等。因而，并非所有抗　生素不能用，有针对性的正确使用还是可行的。　５．２加强对兽用抗菌物的管理我国兽医领域尚　未建立处方药与非处方药制度，是抗菌药不合理使　用、滥用和非法使用重要原因，建议今后应将抗菌　２０１２，４６（４）：５８～６１／周炜，等　中国兽药杂志　院药讯，２０１０，３：２６．　・６１・　药物列入处方药的规范管理，只有兽医师有才权使　用抗菌药，保障原则上尽量选用窄谱抗菌药物，并　尽可能地尽早根据药敏试验选药。与此同时，还可　采取限用策略，如轮作制，即将一类抗菌药停用一　段时期后再用，以恢复细菌对该类药物的敏感性。　在人兽共用抗菌药方面，我国各级管理机构应当严　［３］肖瑶．细菌耐药机制研究进展［Ｊ］．北京医学，２０１１，３（３３）：　２２８—２３１．　［４］Ｈｏｏｔｈｏｎ　Ｔ　Ｍ，Ｌｅｖｙ　Ｓ　Ｂ．Ａｎｔｉｍｉｅｒｏｂｉａｌ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ：Ａ　ｐｌａｎ　ｏｆ　ａｃｔｉｏｎ　ｆｏｒ　ｃｏｍｍｕｎｉｔｙ　ｐｒａｃｔｉｃｅ［Ｊ］．Ａｍ　Ｆａｍ　Ｐｈｙｓｉｃｉａｎ，２０１　１，６３：１０８７一　ｌ０９８．　［５］　吕晓菊．细菌耐药的机制与对策［Ｊ］．临床内科杂志，２００７，　２４：２９５—２９７．　格控制人用抗菌药在畜牧业上的使用，尤其是新型　抗生素，以切断耐药性的传递途径。　５．３　开展深入持久的动物源细菌耐药性监测　就　［６］单霞，黄茂．细菌多重耐药与整合子一基因盒系统［Ｊ］．医　学综述，２０１０，１６：３５４—３５６．　［７］Ｐｉｄｄｏｃｋ　Ｌ　Ｊ．Ｍｕｈｉｄｒｕｇ—ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ｅｆｌｆｕｘ　ｐｕｍｐｓ—ｎｏｔ　ｊｕｓｔ　ｆｏｒ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ［Ｊ］．Ｎａｔ　Ｒｅｖ　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ，２００６，４：６２９—６３６．　国家层面而言，开展动物源细菌耐药性的监测工作　势在必行。通过统一的具可比性的方法在全国或　重点代表性区域开展耐药性调查研究，掌握我国目　前抗菌药耐药性的流行情况，为各级畜牧业行政主　［８］　张启敬．Ａｎｔｉｍｉｅｒｏｂｉａｌ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ：ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ，ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｃｏｎｔｒｏ１．中美动物源细菌耐药性检测与兽药风险评估研讨会　资料［ｃ］．２０１０．　［９］　范柏．喹诺酮类抗菌药的作用机制及细菌耐药性的研究进　展［Ｊ］．国外医药抗生素分册，２００４，ｌ：２７—２９．　［１Ｏ］Ａｎｄｅｒｌ　Ｊ　Ｎ，Ｚａｈｌｌｅｒ　Ｊ，Ｒｏｅ　Ｆ，ｅｔ　ａ１．Ｒｏｌｅ　ｏｆ　ｎｕｔｒｉａｅｎｔ　ｌｉｍｎｉｔａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｓｔａｔｉｏｎａｒｙ—ｐｈａｓｅ　ｅｘｉｓｔｅｎｃｅ　ｉｎ　Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ　ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ　ｂｉｏｆｉｌｍ　管部门制定抗菌药物管理提供数据支撑；通过　建立健全动物源细菌耐药性风险评估体系，为预防　及控制耐药性致病菌的大规模爆发提供科学依据。　６我国动物源细菌耐药性研究进展　综上所述，国内外科学界已对动物源细菌耐药　性的产生及危害、检测方法等诸多方面进行了多年　深入研究。尽管，国内学者对动物源细菌耐药性的　研究不断取得突破性进展，但与国外同行相比，仍　处于起步阶段。如需果要建立细菌耐药性风险评　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ｔｏ　ａｍｐｉｅｉｌｌｉｎ　ａｎｄ　ｅｉｐｍｆｌｏｘａｅｉｎ［Ｊ］．Ａｇｅｎｔｓ　Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ，　２００３，４７：１２５１．　［１１］金少鸿，马越．国内细菌耐药性监测研究的回顾与展望［Ｊ］．　中国抗生素杂志，２００５，５：２５７—２８３．　［１２］吴聪明，汪洋．动物源细菌耐药性监测与流行病学研究［Ｊ］．　中国兽药杂志，２０１０，４４（１）：２３—２５．　［１３］张心如，罗宜熟，杜干英，等．动物源性耐药菌与人类安全　［Ｊ］．兽药与饲料添加剂，２００４，３（９）：３—６．　估体系，为实际预防及控制耐药性致病菌的爆发提　供数据支撑，还需要更为长期、覆盖面更广的细菌　耐药性监测。此外，在耐药菌株亚型定型及溯源等　更为深入的探索，亦有待国内研究者的不懈努力。　参考文献：　［１］吴安华．抗菌药物的发展与细菌耐药［Ｎ］．中国医药报，２００４．　［２］　孙忠实．抗微生物药物耐药性的产生与对策［Ｊ］．浙江省中医　［１４］ＣＩＳＩ．动物源细菌的抗微生物药物纸片扩散和稀释法敏感度　试验执行标准［ｓ］；第三版，２００８．　［１５］宋立，宁宜宝，沈建忠，等．中国不同年代食品动物大肠杆菌　耐药性调查研究［Ｊ］，中国科学ｃ辑：生命科学，２００９，７：　６９２—６９８．　［１６］潘志明，焦新安，刘文博，等．鸡白痢沙门氏菌耐药性的监测　研究［Ｊ］．畜牧兽医学报，２００２，３３：３７７—３８３．　［１７］雷连成，韩文瑜，郑丹．大肠杆菌流行株耐药特性对其免疫　效果的影响［Ｊ］．吉林农业大学学报，２００５，５：５５４—５５８．　（上接第５７页）　［２８］陈蒲丹，刘娟．青蒿及其提取物对鸡柔嫩艾美耳球虫的抑制　作用［Ｊ］．中兽医医药杂志，２００８，２：２４—２６．　［２９］张灿，李相钊，郭义，等．“中宝杀球散”对鸡柔嫩艾美耳球　虫病的疗效试验［Ｊ］．动物医学进展，２００８，２９（９）：５Ｏ一５１．　［３Ｏ］戴和斌，夏彤，赵林峰，等．复方青蒿合剂治疗鸡球虫病初探　［Ｊ］．中国家禽，２００９，３１（１０）：５５—５６．　［３１］郭红斌，弓素梅．青蒿素与青蒿水提液对感染柔嫩艾美耳球　虫肉鸡的疗效评价［Ｊ］．动物医学进展，２０１１，３２（３）：８２—８５．　ｎｏｌｏｇｙ，２００８，２２：７．　［３４］Ｅｍｉｌｉｏ　Ｄ　Ｃ，Ｍａｒｇａｒｉｔａ　Ｇ，Ｍａｒｉａ　Ｆ，ｅｔ　ａ１．Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ａｒｔｅｍｉｓｉｎｉｎ　ｏｎ　ｏｏｃｙｓｔ　ｗａｌｌ　ｆｏｒｍａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｓｐｏｒｕｌａｔｉｏｎ　ｄｕｒｉｎｇ　Ｅｉｍｅｒｉａ　ｔｅｎｅｌｌａ　ｉｎｆｅｃ—　ｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｐａｒａｓｉｔｏｌｏｇｙ　Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，２０１０，５９（４）：５０６—５１１．　［３５］ＡｍｉｒＡ　Ｓ，ＳｅｙｅｄＨＭ，ＨｏｓｓｅｉｎＡＡ，ｅｔ　ａ１．Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ａｒｔｅｍｉｓｉｎｉｎｉｎ　ｂｒｏｉｌｅｒ　ｃｈｉｃｋｅｎｓ　ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ　ｃｈｒｏｎｉｃ　ｏｒａｌ　ｉｎｔａｋｅ『Ｊ］．Ｔｒｏｐ　Ａｎｉｍ　Ｈｅａｌｔｈ　Ｐｒｏｄ，２０１１，４３：８４３—８４９．　［３６］宁长申，张龙现，祁小乐，等．人工合成青蒿素对鸡柔嫩艾美　耳球虫病的预防试验［Ｊ］．河南农业科学，２００１，１２：２９—３０．　［３７］李金贵，朱奎．青蒿素包合物的表征及其对鸡球虫病的防治　评价［Ｊ］．中国兽药杂志，２００７，４２（２）：３６—３８．　［３８］孟伟．人工合成青蒿素对鸡柔嫩艾美耳球虫病的预防试验　［Ｊ］．河南畜牧兽医，２００８，２９（１１）：５—６．　［３９］Ａｒａｂ　Ｈ　Ａ，Ｍａｒｄｊａｎｍｅｈｒ　Ｓ　Ｈ，Ｓｈａｈｂａｚｆａｒ　Ａ，ｅｔ　ａ１．Ｔｏｘｉｅｏｐａｔｈｏｌｏｇｉｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ａｒｔｅｍｉｓｉｎｉｎ　ｉｎ　ｂｒｏｉｌｅｒ　ｃｈｉｃｋｅｎｓ　ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ　ａ　ｓｉｎｇｌｅ　ｏｒａｌ　Ｉ　３２　Ｉ　Ａｒａｂ　Ｈ　Ａ，Ｒａｈｂａｒｉ　Ｓ，Ｍｏｓｌｅｍｉ　Ｍ　Ｈ，ｅｔ　ａ１．Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ａｒｔｅ．　ｍｉｓｉｎｉｎ　ｉｎ　Ａｒｔｅｍｉｓｉａ　ｓｉｅｂｅｒｉ　ａｎｄ　ａｎｔｉｃｏｅｅｉｄｉｌ　ｅｆａｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｐｌａｎｔ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｉｎ　ｂｒｏｉｌｅｒ　ｃｈｉｃｋｅｎｓ［Ｊ］．Ｔｒｏｐｉｃａｌ　Ａｎｉｍａｌ　Ｈｅａｌｔｈ　ａｎｄ　Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ，２００６，３８（６）：４９７—５０３．　［３３］Ｂｒｉｓｉｂｅ　Ｅ　Ａ，Ｕｍｏｒｅｎ　Ｕ　Ｅ，Ｏｗａｉ　Ｐ　Ｕ，ｅｔ　ａ１．Ｄｉｅｔａｒｙ　ｉｎｃｌｕｓｉｏｎ　ｏｆ　ｄｒｉｅｄ　Ａｒｔｅｍｉｓｉａ　ａｎｎｕａ　ｌｅａｖｅｓ　ｆｏｒ　ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ　ｏｆ　ｃｏｅｃｉｄｉｏｓｉｓ　ａｎｄ　ｄｏｓｅ：Ａｎ　ＬＤ５０　ｓｔｕｄｙ［Ｊ］．Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｐｏｕｌｔｒｙ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，　２００９，８（８）：８０８—８１２．　ｇｒｏｗｔｈ　ｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ　ｉｎ　ｃｈｉｃｋｅｎｓ『Ｊ］．Ａｆｒｉｃａｎ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｂｉｏｔｅｅｈ—