临床基因扩增检验实验室HBV-DNA标本处理的标准操作程
序
一、目的:
规范临床基因扩增检验实验室对临床标本的处理,提高检测结果的准确率。 二、适用范围:
中山大学达安基因股份有限公司乙型肝炎病毒核酸扩增荧光检测试剂盒。 三、职责:
由临床基因扩增检验实验室专业技术人员制定程序文件,实验室负责人审核,科室主任批准实施。 四、程序:
1、打开加热器,设定温度 100℃。
2、从试剂盒中取出DNA提取液、阴性对照、阳性对照,让其在室温下完全融化。
3、将DNA提取液、强阳性对照、临界阳性对照、阴性对照于振荡混匀器振荡5s,6000—8000rpm离心5s。 4、取40ulDNA提取液,分别加到1.5ml离心管中。 5、再加入待测样本血清或试剂盒中的阳性对照品40ul,振荡混匀。
6、放入100℃干浴或沸水浴10min。
7、转至4℃静置8~12小时,10000rpm离心5min,保留上
清4℃保存备用(如需长期保存请放置于-20℃)。 8、离心管取出转移至加样区,取上清液2ul加样进行PCR扩增。
此标准操作变更程序:如果本操作程序使用者在实际工作中发现其存在问题,则应向科室负责人提出,科室负责人则召集所有与本程序有关的人员讨论,以决定是否需要变更本程序。
1.5ml灭菌离心管中加入40ulDNA提取液 样本:血清 加入40ul待测样本/对照HBV样本处理流程图
振荡混匀 100℃沸水浴10min 4℃充解8-12小时 10000rpm离心5min
取上清2ul点样 反应管瞬时离心
上PCR仪扩增