中国部分地区猪细环病毒1型和2型的分子检测

８４·　微生物与感染Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆＭｉｃｒｏｂｅｓ　ａｎｄ　Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ，Ｊｕｎｅ　２５，２０１０，５（２）．．８４－８８　ｈｔｔｐ：ｆｊｍｉ，ｆｕｄａｎ，ｅｄｕ．ｃｎ　论著　●　中国部分地区猪细环病毒１型和２型的分子检测　翟少伦　一，龙进学　，岳城　，袁世山　１．中国农业科学院上海兽医研究所猪传染病防治研究室，上海２００２４１；２．农业大学动物医学学院，乌　鲁木齐８３００５２　摘要：细环病毒（ＴＴｖ）是近年来发现的一种新型人畜共患ＤＮＡ病毒，广泛存在于包括人类和家畜在内的　多种哺乳动物中。目前我国猪群中ＴＴＶ的流行病学报道较少。为研究猪细环病毒（Ｐ１＿ｒＶ）在我国的流行情　况，采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）对２００９年我国９个省市部分发病猪场中的ｆｒｒＴＶ１和ＰＴＴＶ２进行检测。结果　显示，１９１份病料中ＰＴＴＶ的总阳性率为７７．０％（１４７／１９１），其中Ｐ１＿ｒＶ１的单一阳性率为６８．６％（１３１／１９１），　ＰｒＩＴｖ２的单一阳性率为５３．９％（１０３／１９１），两基因型的共感染率为４５．５％（８７／１９１）。进一步分析发现，在不　同猪场、不同年龄猪群、不同病料组织中，ＰＴＴＶ的感染情况均不相同。此外，对４１份健康猪的血清进行检　测，结果显示，Ｐ１１ＴＶ总阳性率、Ｐ１ＴｒＶ１单一阳性率、Ｐ１　Ｖ２单一阳性率及两基因型的共感染率分别为　４３．９％（１８／４１）、３６．６％（１５／４１）、２４．４％（１０／４１）和１２．２％（５／４１）。结果提示，发病猪体内ＰＴＴＶ总阳性率、　Ｐ１＿ｒｖ１单一阳性率、Ｉｙ１＿ｒｖ２单一阳性率及两基因型的共感染率均显著高于健康猪（Ｐ＜０．０１）。Ｐ１叮Ｖ在临　床上是否对猪致病或与其他病原有协同作用，需进一步研究。　关键词：猪细环病毒１型；猪细环病毒２型；聚合酶链反应；混合感染　Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｐｏｒｃｉｎｅ　Ｔｏｒｑｕｅ　ｔｅｎｏ　ｖｉｒｕｓ　ｇｅｎｏｇｒｏｕｐｓ　１　ａｎｄ　２　ｉｎ　ｐｉｇｓ　ｆｒｏｍ　ｐａｒｔｉａｌ　ｒｅｇｉｏｎｓ　ｏｆ　Ｃｈｉｎａ　ＺＨＡＩ　Ｓｈａｏ—Ｌｕｎ　，ＬＯＮＧ　Ｊｉｎ－Ｘｕｅ　，ＹＵＥ　Ｃｈｅｎｇ　，ＹＵＡＮ　Ｓｈｉ—Ｓｈａｎ　１．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｓｗｉｎｅ　Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ　Ｄｉｓｅａｓｅｓ，Ｓｈａｎｇｈａｉ　Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｃｈｉｅｎｓｅ　Ａｃａｄｅｍｙ　ｏ｛　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｓｈａｎｇｈａｉ　２００２４１，Ｃｈｉｎａ；２．Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｖｅｔｅｒｉａｎｒｙ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｘｉｎｊｉａｎｇ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｕｒｕｍｑｉ　８３００５２，Ｃｈｉｎａ　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｏｒｑｕｅ　ｔｅｎｏ　ｖｉｒｕｓ（Ｔｒ、，）ｉｓ　ａｎ　ｅｍｅｒｇｉｎｇ　ｚｏｏｎｏｔｉｃ　ＤＮＡ　ｖｉｒｕｓ　ｔｈａｔ　ｉｓ　ｆｒｅｑｕｅｎｔｌｙ　ｄｅｔｅｃｔｅｄ　ｉｎ　ｍａｎｙ　ｖｅｒｔｅｂｒａｔｅｓ，ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ　ｈｕｍａｎｓ　ａｎｄ　ｌｉｖｅｓｔｏｃｋ．Ａｔ　ｐｒｅｓｅｎｔ，ｔｈｅｒｅ　ｉＳ　ｌｉｔｔｌｅ　ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ　ａｖａｉｌａｂｌｅ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｐｒｅｖａｌｅｎｃｅ　ｏｆ　ｐｏｒｃｉｎｅ　Ｔｒ、，（ＰＴＦＶ）ｉｎ　Ｃｈｉｎａ．Ｉｎ　ｏｒｄｅｒ　ｔｏ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ　ｔｈｅ　ｅｐｉｄｅｍｉｃ　ｓｔａｔｕｓ　ｏｆ　ＰＴＴＶ　ｉｎ　Ｃｈｉｎａ。　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｐ　ＴＶ　ｇｅｎｏｔｙｐｅ　１（ＰＴＴＶ　１）ａｎｄ　ＰＴＴＶ　ｇｅｎｏｔｙｐｅ　２（ＰＴｒＶ　２）ｉｎ　１９１　ｓａｍｐｌｅｓ　ｆｒｏｍ　ｄｉｓｅａｓｅｄ　ｐｉｇｓ　ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ　ｆｒｏｍ　ｎｉｎｅ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｒｅｇｉｏｎｓ　ｗａｓ　ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｏｕｔ　ｏｆ　ｔｈｅｓｅ　１９１　ｓａｍｐｌｅｓ，１４７　（７７．０％）ｗｅｒｅ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｆｏｒ　ｍＶ，１３１（６８．６％）ｗｅｒｅ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｆｏｒ　ＰｒｒＴＶ１，１０３（５３．９％）ｗｅｒｅ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｆｏｒ　兀　Ｖ２，ａｎｄ　８７（４５．５％）ｗｅｒｅ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｆｏｒ　ｂｏｔｈ　ＰＴｒＶ１　ａｎｄ　ｍｖ２．Ｆ＿ｕｒｔｈｅｒ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｒｅｖｅａｌｅｄ　ｔｈａｔ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　ｒａｔｅｓ　ｏｆ　ｍＶ　ｆｒｏｍ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｆａｒｍｓ，ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｓａｍｐｌｅ　ｔｙｐｅｓ，ａｎｄ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ａｇｅｓ　ｖａｒｉｅｄ．Ｆｏｒｔｙ—　ｏｎｅ　ｓｅｒｕｍ　ｓａｍｐｌｅｓ　ｆｒｏｍ　ｈｅａｌｔｈｙ　ｐｉｇｓ　ｗｅｒｅ　ａｌｓｏ　ｄｅｔｅｃｔｅｄ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｏｕｔ　ｏｆ　ｔｈｅｓｅ　４１　ｓａｍｐｌｅｓ，１８　（４３．９％）ｗｅｒｅ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｆｏｒ　ｆｒｒ］　Ｖ，１５（３６．６％）ｗｅｒｅ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｆｏｒ　Ｐ１＿ｒＶ１，１０（２４．４％）ｗｅｒｅ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｆｏｒ　Ｐ丌ｖ２，ａｎｄ　５（１２．２％）ｗｅｒｅ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｆｏｒ　ｂｏｔｈ　ＰＴＴＶ１　ａｎｄ　ＰＴＴｖ２．Ｔｈｅｓｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｉｎｄｉｃａｔｅ　ｔｈａｔ删ｈａｓ　ａ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｈｉｇｈｅｒ　ｐｒｅｖａｌｅｎｃｅ　ｉｎ　ｄｉｓｅａｓｅｄ　ｐｉｇｓ　ｔｈａｎ　ｉｎ　ｈｅａｌｔｈｙ　ｐｉｇｓ（Ｐ＜０．０１）．Ｗｈｅｔｈｅｒ　ＰＴｒＶ　ｐｌａｙｓ　ａ　ｒｏｌｅ　基金项目：“十一五”国家科技支撑计划（２【】０６ＢＡＤＯ６ＡＯ１、２００６ＢＡＤＯ６ＡＯ４）　通信作者：袁世山，龙进学　Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ　ａｕｔｈｏｒｓ．ＹＵＡＮ　Ｓｈｉ—Ｓｈａｎ，Ｅ－ｍａｉｌ：ｓｈｉｓｈａｎｙｕａｎ＠ｓｈｖｒｉ．ａｃ．ｏｎ；ＬＯＮＧ　Ｊｉｎ—Ｘｕｅ，Ｅ－ｍａｉｌ：ｌｏｎｇｊｘ＠ｓｈｖｒｉ．ａｃ．ｃａ　翟少伦，等：中国部分地区猪细环病毒１型和２型的分子检测　ｉｎ　ｓｗｉｎｅ　ｄｉｓｅａｓｅ　ｏｒ　ｈａｓ　ａ　ｓｙｎｅｒｇｉｓｔｉｃ　ｅｆｆｅｃｔ　ｗｉｔｈ　ｏｔｈｅｒ　ｐａｔｈｏｇｅｎｓ　ｓｈｏｕｌｄ　ｂｅ　ｆｕｒｔｈｅｒ　ｓｔｕｄｉｅｄ　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｇｅｎｏｇｒｏｕｐ　１　ｐｏｒｃｉｎｅ　Ｔｏｒｑｕｅ　ｔｅｎｏ　ｖｉｒｕｓ；Ｇｅｎｏｇｒｏｕｐ　２　ｐｏｒｃｉｎｅ　Ｔｏｒｑｕｅ　ｔｅｎｏ　ｖｉｒｕｓ；Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ　ｃｈａｉｎ　ｒｅａｃｔｉｏｎ；Ｃｏ—ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　细环病毒（Ｔｏｒｑｕｅ　ｔｅｎｏ　ｖｉｒｕｓ，ＴＴＶ）［１３于１９９７　年由日本科学家Ｎｉｓｈｉｚａｗａ等【一　］在１例输血后肝炎　患者的血清中发现，并将该病毒以患者的名字命名　为Ｔｏｒｑｕｅ　ｔｅｎｏ　ｖｉｒｕｓ。其基因组为单股环状ＤＮＡ，　此前被划为圆环病毒科［３ｊ，随后被划为的指环　病毒属ｌ４］。猪细环病毒（ｐｏｒｃｉｎｅ　Ｔｏｒｑｕｅ　ｔｅｎｏ　ｖｉｒｕｓ，ＰＴＴＶ）分２个基因型（ＰＴＴＶ１和ＰＴＴＶ２）。　研究认为，患仔猪断奶多系统衰竭综合征的猪群易　感染ＰＴＴＶ２ｌ５ｊ。ＰＴＴＶ１与猪圆环病毒２型　（ｐｏｒｃｉｎｅ　ｃｉｒｃｏｖｉｒｕｓ　ｔｙｐｅ　２，ＰＣＶ２）和猪繁殖与呼吸　综合征病毒（ｐｏｒｃｉｎｅ　ｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅ　ａｎｄ　ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ　ｓｙｎｄｒｏｍｅ　ｖｉｒｕｓ，ＰＲＲＳＶ）共感染可导致仔猪断奶多　系统衰竭综合征、猪肾病与皮炎综合征的发生［６　］。　目前，ＰＴＴＶ１和ＰＴＴＶ２的流行已在世界多个　国家报道，我国报道还较少。本研究通过聚合酶链　反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ　ｃｈａｉｎ　ｒｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）检测　２００９年收集的我国部分发病猪场及健康猪场的２３２　份样品，调查ＰＴＴＶ１及ＰＴＴＶ２的流行情况，为　ＰＴＴＶ感染的防控提供理论依据。　１材料和方法　１．１材料　样品包括２００９年送检的来自我国９个省市发　病猪场的１０４份组织、８０份血清和７份精液，以及　４１份健康猪血清。病毒ＤＮＡ提取试剂盒为天根公　司产品，ＰＣＲ常用相关试剂为东盛公司产品。　１．２病毒核酸的提取　取２００－－３００　ｍｇ组织样品匀浆处理，用１　ｍｌ磷　酸缓冲液（ｐｈｏｓｐｈａｔｅ．ｂｕｆｆｅｒｅｄ　ｓａｌｉｎｅ，ＰＢＳ）稀释溶　解，分别取２００　ｌ组织和血清，按ＤＮＡ提取试剂盒　说明书操作。提取后的ＤＮＡ溶于５０　ｔｄ　Ｔｒｉｓ—　ＥＤＴＡ缓冲液中，冻存于一３０℃备用。　１．３　ＰＣＲ扩增　检测ＰＴＴＶ１所用引物（ＰＴＴＶ１－Ｆ：５．＿　ＣＧＧＧＴＴＣＡＧＧＡＧＧＣＴＣＡＡＴ．３　；ＰＴＴＶ１一Ｒ：５．＿　ＧＣＣＡＴＴＣＧＧＡＡＣＴＧＣＡＣＴＴＡＣＴ一３　）以及检测　ＰＴＴＶ２所用引物（ＰＴＴＶ２一Ｆ：５ｆ－ＴＣＡＴＧＡＣＡＧＧ　ＧＴＴＣＡＣＣＧＧＡＡ．３　；ＰＴＴＶ２一Ｒ：５　．ＣＧＴＣＴＧＣ　ＧＣＡｃＴＴＡＣＴＴＡＴＡＴＡＣＴＣＴＡ．３　）参考已发表文　献ｌ８］，由上海Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ公司合成。ＰＴＴＶ１和　ＰＴＴＶ２的ＰＣＲ目的产物大小分别为３０５　ｂｐ和２５３　ｂｐ。ＰＣＲ体系及反应程序略有改动。检测ＰＴＴＶ１　的ＰＣＲ反应体系（２５　１）：ＰＴＴｖ１一Ｆ（１０　ｍｏｌ／Ｌ）　０．５　ｔＡ，ＰＴＴＶ１．Ｒ（１０肚ｍｏｌ／Ｌ）０．５　ｌ，２×Ｍｉｘ　１２．５　ｌ，ｄｄＨ２ｏ　８．５　ｌ，ＤＮＡ　３　１。ＰＣＲ反应程　序：９４℃预变性５　ｍｉｎ；９４℃变性１５　Ｓ，６０℃退火　２０　Ｓ，７２℃延伸３０　Ｓ，５０个循环；７２℃再延伸５　ｍｉｎ。　检测ＰＴＴＶ２的ＰＣＲ反应体系及反应条件同　ＰＴＴＶ１。　１．４统计学分析　为评估发病猪场及健康猪场中ＰＴＴＶ流行情　况是否存在显著性差异，进行卡方检验，Ｐ＜０．０５　为有显著性差异。　２结果　２．１　Ｐ１ＴＶ在发病猪样品中的检测结果　提取１９１份病料的ＤＮＡ，分别用ＰＴＴＶ１和　ＰＴＴＶ２特异性引物进行ＰＣＲ检测，产物进行凝胶　电泳分析。结果１４７份病料出现目的条带，部分样　品检测的电泳结果见图１。　检测结果显示，ＰＴＴＶ在我国送检病料的不同　地域均有流行。９个省市送检病料中，ＰＴＴＶ的总　阳性率为６１．０％～１００％（表１）。其中，、安徽、　北京、江苏和河北送检病料中ＰＴＴＶ总阳性率高达　１００％。进～步分析发现，病料中ＰＴＴＶｌ与　ＰＴＴＶ２的共感染率也较高。ＰＴＴＶ在病猪性别或　年龄方面的流行病学分析显示，种公猪和种母猪存　在较高的流行（６９．２％～ｌ００％），同时死胎中也检测　到ＰＴＴＶ１和ＰＴＴＶ２的存在。另外，在送检的７份　精液中仅３份检出ＰＴＴＶ１，没有检测到ＰＴＴＶ２（样　品数量有限）。结果提示，ＰＴＴＶ可通过性接触、人　工授精等垂直传播，这可能是仔猪ＰＴＴＶ感染率高　（８０．３％）的原因之一（表２）。对不同类型样品中　ＰＴＴＶ的阳性率分析显示，组织样品中感染率略高　于血清样品（表３）。　根据样品的送检日期，按季度分析ＰＴＴＶ的检　出率（图２）。结果显示，ＰＴＴＶ在２００９年第３、４季　度呈高流行，但无显著差异。　翟　！笠：　国部分地区猪细环病毒１型和２型的分子检测　表３病猪不同类型样品中ＰＴ１１Ｖ的检测结果　Ｔａｂ．３　Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ｍＶ　ｉｎ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｓａｍｐｌｅ　ｔｙｐｅｓ　ｆｒｏｍ　ｄｉｓｅａｓｅｄ　ｐｉｇｓ　旦　巴　ａ）　∞　ｏ　图２　２００９年不同季度　的流行情况　Ｆｉｇ．２　Ｐｒｅｖａｌｅｎｃｅ　ｏｆ　ＰＩ　ｒＶ　ｉｎ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｑｕａｒｔｅｒｓ　ｉｎ　２００９　２．２　ＰＴＩ　在健康猪血清中的检测结果　采取同样的ＰＣＲ方法，检测４１份健康猪血清　中ＰＴＴＶ的感染情况。结果显示，ＰＴＴＶ总阳性　率、ＰＴＴＶ１单一阳性率、ＰＴＴＶ２单一阳性率及两基　因型的共感染率分别为４３．９％（１８／４１）、３６．６％　（１５／４１）、２４．４％（１０／４１）和１２．２％（５／４１）。卡方检　验结果显示，健康猪体内唧阳性率、唧１单一　阳性率、Ｐ１ＴＶ２单一阳性率及两基因型共感染率均　比发病猪低（Ｐ＜０．０１）。提示　在发病猪体内　可能起一定作用。健康猪隐性携带病毒，因此唧　可通过地区问的生猪贸易和引种等行为而广泛扩散。　３讨论　ＴＴＶ是指环病毒属成员之一，基因组大小为２　４　ｋｂ。ＰＴＴＶ的基因组大小为２．７～２．９　ｋｂ，目前　分为２个不同的基因型（ＰＴＴＶｌ和ＰＴＴＶ２）。自　２００２年日本研究人员Ｌ。］分离、鉴定了第１株ＰＴＴＶ　（Ｓｄ—ＴＴＶ３１株，ＧｅｎＢａｎｋ登录号为ＡＢ０７６００１）以　来，至今共有６株ＰＴＴＶ全基因序列报道，包括４　株ＰＴＴＶ１和２株ＰＴＴＶ２，但ＰＴＴＶ１与ＰＴＴＶ２的　同源性不到５０％ｌ＿１　。大量研究认为，不同物种　ＴＴＶ的非编码区序列比较保守，ＰＴＴＶ１和ＰＴＴＶ２　的非编码区也具有保守的基因组序列，因此，目前　ＰＴＴＶ的检测法多为基于此保守序列而建立的　ＰＣＲ（套式ＰＣＲ或ＰＣＲ）。１９９９年，Ｌｅａｒｙ等ｕ１］按　照人ＴＴＶ的非编码区保守序列设计１对用于检测　猪群中ＰＴＴＶ的引物，结果显示猪群中ＰＴＴＶ的阳　性率为２０％。２００４年，ＭｃＫｅｏｗｎ等［１。］采用按ｓｄ．　ＴＴＶ３ｌ株序列建立的ＰＣＲ法检测北京附近商业养　猪场的２０份血清样品，其中１６份存在ＰＴＴＶ感　染，这是我国最早报道的ＰＴＴＶ１流行，但未进行分　型。随后，有报道在韩国、泰国、加拿大、美国、法　国＿１　、意大利［１　］及西班牙［Ｓ，１２，１５］等国家猪群中存在　ＰＴＴＶ。此外，研究认为ＰＴＴＶ在欧洲野猪中也相　当流行　引。　对于我国猪群中ＰＴＴＶ的检测，目前有２篇报　道。孙泉云等ｌ】　］采用荧光ＰＣＲ检测随机采样的　４００份猪血清，ＰＴＴＶ感染率为３．７５％；王礞礞　等ｌ１　］采用套式ＰＣＲ检测７个省市共２５８份临床病　料发现，ＰＴＴＶ１的单一阳性率为３７．６％，ＰＴＴＶ２　的单一阳性率为８２．６％，两基因型的共感染率为　３８．４％。本研究结果显示，临床发病猪中ＰＴＴＶ总　阳性率为７７．０％，其中ＰＴＴＶ１的单一阳性率为　６８．６％，ＰＴＴＶ２的单一阳性率为５３．９％，两基因型　的共感染率为４５．５％。本研究结果中，ＰＴＴＶ１和　ＰＴＴＶ２单独感染率与王礞礞等的研究结果差异显　著，但共感染率无显著差异。孙泉云等报道的　ＰＴＴＶ在猪群中的低感染率与本研究结果相差甚　远，因为我们检测到ＰＴＴＶ在健康猪体内也有较高　的流行率（４３．９％）。原因可能是不同研究中所采用　的检测方法及所采集的样品不同所致。　关于ＰＴＴＶ的传播，先前研究认为可能的途径　为粪．口传播［珀］、垂直传播［＝２ｏ］、子宫传播［　、疫苗传　播［　、性传播ｌ２２　等，本研究中也在母猪血清、公猪精　液及死胎中检测到ＰＴＴＶ，再次证实ＰＴＴＶ可通过　精液、子宫等进行垂直传播。此外，本研究还在健康　猪体内检测到较高的ＰＴＴＶ感染率，提示在进行跨　地区引种及频繁生猪贸易中，健康猪携带ＰＴＴＶ可　能也是传播的重要途径。　目前，在体外还没有合适的研究ＰＴＴＶ的细胞　及动物模型，因此其单独的致病性尚不清楚。本研　８８·　微生物与感染Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆＭｉｃｒｏｂｅｓ　ａｎｄ　Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ，Ｊｕｎｅ　２５，２０１０，５（２）：８４　８８　［１０］Ｎｉｅｌ　Ｃ，Ｄｉｎｉｚ—Ｍｅｎｄｅｓ　Ｌ，Ｄｅｖａｌｌｅ　Ｓ．Ｒｏｌｌｉｎｇ－ｃｉｒｃｌｅ　ａｍｐｌｉｆｉ－　ｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｔｏｒｑｕｅ　ｔｅｎｏ　ｖｉｒｕｓ（ｒｒＶ）ｃｏｍｐｌｅｔｅ　ｇｅｎｏｍｅｓ　ｆｒｏｍ　ｈｕｍａｎ　ａｎｄ　ｓｗｉｎｅ　ｓｅｒａ　ａｎｄ　ｔｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉＯｎ　ｏｆ　ａ　ｎｏｖｅｌ　ｓｗｉｎｅ　究随机选取来自我国部分省市发病猪和健康猪的样　品进行ＰＴＴＶ检测，结果显示发病猪群中ＰＴＴＶ流　行率显著高于健康猪。有研究认为ＰＴＴＶ与仔猪　断奶多系统衰竭综合征ｌ＿６］、猪皮炎与肾病综合征＿７］　的发生有关。本研究结果初步表明，临床上ＰＴＴＶ　与目前我国复杂的猪病有一定联系：其单独感染可　能引起感染猪发病，也可能与其他病原产生协同致　病作用。目前，ＰＲＲＳＶ和ＰＣＶ２感染在我国猪群　中广泛流行。ＰＴＴＶ在猪群中存在如此高的感染　ＴＴＶ　ｇｅｎｏｇｒｏｕｐ［Ｊ］．Ｊ　Ｇｅｎ　Ｖｉｒｏｌ，２００５，８６（Ｐｔ　５）：　１３４３．１３４７．　ｒ１１］Ｌｅａｒｙ　ＴＰ，Ｅｒｋｅｒ　ＪＣ，Ｃｈａｌｍｅｒｓ　ＭＬ，Ｄｅｓａｉ　ＳＭ，Ｍｕｓｈａｈｗａｒ　ＩＫ．Ｉｍｐｒｏｖｅｄ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｓｙｓｔｅｍｓ　ｆｏｒ　ＴＴ　ｖｉｒｕｓ　ｒｅｖｅａｌ　ｈｉｇｈ　ｐｒｅｖａｌｅｎｃｅ　ｉｎ　ｈｕｍａｎｓ，ｎｏｎ－ｈｕｍａｎ　ｐｒｉｍａｔｅｓ　ａｎｄ　ｆａｒｍ　ａｎｉｍａｌｓ＿Ｊ］．Ｊ　Ｇｅｎ　Ｖｉｒｏｌ，１９９９，８０（Ｐｔ　８）：２１１５－２１２０．　［１２］ＭｃＫｅｏｗｎ　ＮＥ，Ｆｅｎａｕｘ　Ｍ，Ｈａｌｂｕｒ　ＰＧ，Ｍｅｎｇ　ＸＪ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｐｏｒｃｉｎｅ　ＴＴ　ｖｉｒｕｓ，ａｎ　ｏｒｐｈａｎ　ｖｉｒｕｓ，ｉｎ　率，极可能会加剧ＰＲＲＳＶ和ＰＣＶ２感染的大流行。　因此，ＰＴＴＶ值得广大研究者关注，其具体的致病机　制需要深入研究。　参考文献　Ｅ１］陆承平主编．兽医微生物学［Ｍ］．第四版．北京：中国农业出　版社，２００７，３７６，　［２］Ｎｉｓｈｉｚａｗａ　Ｔ，Ｏｋａｍｏｔｏ　Ｈ，Ｋｏｎｉｓｈｉ　Ｋ，Ｙｏｓｈｉｚａｗａ　Ｈ，　Ｍｉｙａｋａｗａ　Ｙ，Ｍａｙｕｍｉ　Ｍ．Ａ　ｎｏｖｅｌ　ＤＮＡ　ｖｉｒｕｓ（ＴＴＶ）　ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｅｌｅｖａｔｅｄ　ｔｒａｎｓａｍｉｎａｓｅ　ｌｅｖｅｌｓ　ｉｎ　ｐｏｓｔｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎ　ｈｅｐａｔｉｔｉｓ　ｏｆ　ｕｎｋｎｏｗｎ　ｅｔｉｏｌｏｇｙ［Ｊ］．Ｂｉｏｃｈｅｍ　Ｂｉｏｐｈｙｓ　Ｒｅｓ　Ｃｏｍｍｕｎ，１９９７，２４１（１）：９２—９７．　Ｅ３］Ｂｉａｇｉｎｉ　Ｐ．Ｈｕｍａｎ　ｃｉｒｃｏｖｉｒｕｓｅｓ＿Ｊ］．Ｖｅｔ　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ，２００４，９８　（２）：９５—１０１．　［４］Ｂｉａｇｉｎｉ　Ｐ．Ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ＴＴＶ　ａｎｄ　ｒｅｌａｔｅｄ　ｖｉｒｕｓｅｓ　（ａｎｅｌｌｏｖｉｒｕｓｅｓ）［Ｊ］．Ｃｕｒｒ　Ｔｏｐ　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ　Ｉｍｍｕｎｏｌ，２００９，　３３１：２１．３３．　［５］Ｋｅｋａｒａｉｎｅｎ　Ｔ，Ｓｉｂｉｌａ　Ｍ，Ｓｅｇａｌｅｓ　Ｊ．Ｐｒｅｖａｌｅｎｃｅ　ｏｆ　ｓｗｉｎｅ　Ｔｏｒｑｕｅ　ｔｅｎｏ　ｖｉｒｕｓ　ｉｎ　ｐｏｓｔ·ｗｅａｎｉｎｇ　ｍｕｌｔｉｓｙｓｔｅｍｉｃ　ｗａｓｔｉｎｇ　ｓｙｎｄｒｏｍｅ（ＰＭＷＳ）－－ａｆｆｅｃｔｅｄ　ａｎｄ　ｎｏｎ－－ＰＭＷＳ－·ａｆｆｅｃｔｅｄ　ｐｉｇｓ　ｉｎ　Ｓｐａｉｎ［Ｊ］．Ｊ　Ｇｅｎ　Ｖｉｒｏｌ，２００６，８７（Ｐｔ　４）：８３３．８３７．　［６３　Ｅｌｌｉｓ　ＪＡ，Ａｌｌａｎ　Ｇ，Ｋｒａｋｏｗｋａ　Ｓ．Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｃｏｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　ｗｉｔｈ　ｇｅｎｏｇｒｏｕｐ　１　ｐｏｒｃｉｎｅ　ｔｏｒｑｕｅ　ｔｅｎｏ　ｖｉｒｕｓ　ｏｎ　ｐｏｒｃｉｎｅ　ｃｉｒｃｏｖｉｒｕｓ　ｔｙｐｅ　２－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｐｏｓｔｗｅａｎｉｎｇ　ｍｕｌｔｉｓｙｓｔｅｍｉｃ　ｗａｓｔｉｎｇ　ｓｙｎｄｒｏｍｅ　ｉｎ　ｇｎｏｔｏｂｉｏｔｉｃ　ｐｉｇｓ　ｒＪ］．Ａｍ　Ｊ　Ｖｅｔ　Ｒｅｓ，２００８，６９　（１２）：１６０８．１６１４．　［７３　Ｋｒａｋｏｗｋａ　Ｓ，Ｈａｒｔｕｎｉａｎ　Ｃ，Ｈａｍｂｅｒｇ　Ａ，Ｓｈｏｕｐ　Ｄ，Ｒｉｎｇｓ　Ｍ，Ｚｈａｎｇ　Ｙ，Ａｌｌａｎ　Ｇ，Ｅｌｌｉｓ　ＪＡ．Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｏｐｒｃｉｎｅ　ｄｅｒｍａｔｉｔｉｓ　ａｎｄ　ｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ　ｓｙｎｄｒｏｍｅ　ｉｎ　ｇｎｏｔｏｂｉｏｔｉｃ　ｐｉｇｓ　ｗｉｔｈ　ｎｅｇａｔｉｖｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｆｏｒ　ｐｏｒｃｉｎｅ　ｃｉｒｃｏｖｉｒｕｓ　ｔｙｐｅ　２＿Ｊ］．　Ａｍ　Ｊ　Ｖｅｔ　Ｒｅｓ，２００８，６９（１２）：１６１５．１６２２．　［８３　Ｋｅｋａｒａｉｎｅｎ　Ｔ，Ｍａｒｔｉｎｅｚ－Ｏｕｉｎｏ　Ｌ，Ｓｅｇａｌｅｓ　Ｊ．Ｓｗｉｎｅ　ｔｏｒｑｕｅ　ｔｅｎｏ　ｖｉｒｕｓ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｉｎ　ｐｉｇ　ｃｏｍｍｅｒｃｉａｌ　ｖａｃｃｉｎｅｓ，ｅｎｚｙｍｅｓ　ｆｏｒ　ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　ｕｓｅ　ａｎｄ　ｈｕｍａｎ　ｄｒｕｇｓ　ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ　ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ　ｏｆ　ｐｏｒｃｉｎｅ　ｏｒｉｇｉｎ［Ｊ］．Ｊ　Ｇｅｎ　Ｖｉｒｏｌ，２００９，９０（Ｐｔ　３）：６４８，６５３．　［９］Ｏｋａｍｏｔｏ　Ｈ，Ｔａｋａｈａｓｈｉ　Ｍ，Ｎｉｓｈｉｚａｗａ　Ｔ，Ｔａｗａｒａ　Ａ，Ｆｕｋａｉ　Ｋ，Ｍｕｒａｍａｔｓｕ　Ｕ，Ｎａｉｔｏ　Ｙ，Ｙｏｓｈｉｋａｗａ　Ａ．Ｇｅｎｏｍｉｃ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ＴＩ＂ｖｉｒｕｓｅｓ（ＴＴＶｓ）ｉｎ　ｐｉｇｓ，ｃａｔｓ　ａｎｄ　ｄｏｇｓ　ａｎｄ　ｔｈｅｉｒ　ｒｅｌａｔｅｄｎｅｓｓ　ｗｉｔｈ　ｓｐｅｃｉｅｓ－ｓｐｅｃｉｆｉｃ　ＴＴＶｓ　ｉｎ　ｐｒｉｍａｔｅｓ　ａｎｄ　ｔｕｐａｉａｓ［Ｊ］．Ｊ　Ｇｅｎ　Ｖｉｒｏｌ，２００２，８３（Ｐｔ　６）：１２９１—１２９７．　ｐｉｇｓ　ｆｒｏｍ　ｓｉｘ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｃｏｕｎｔｒｉｅｓ［Ｊ］．Ｖｅｔ　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ，２００４，　１０４（１－２）：１１３。１１７．　［１３］Ｂｉｇａｒｒｅ　Ｌ，Ｂｅｖｅｎ　Ｖ，ｄｅ　Ｂｏｉｓｓｅｓｏｎ　Ｃ，Ｇｒａｓｌａｎｄ　Ｂ，Ｒｏｓｅ　Ｎ，　Ｂｉａｇｉｎｉ　Ｐ，Ｊｅｓｔｉｎ　Ａ．Ｐｉｇ　ａｎｅｌｌｏｖｉｒｕｓｅｓ　ａｒｅ　ｈｉｇｈｌｙ　ｐｒｅｖａｌｅｎｔ　ｉｎ　ｓｗｉｎｅ　ｈｅｒｄｓ　ｉｎ　Ｆｒａｎｃｅ［Ｊ］．Ｊ　Ｇｅｎ　Ｖｉｒｏｌ，２００５，８６（Ｐｔ　３）：　６３１．６３５．　Ｅｌ４］Ｍａｒｔｅｌｌｉ　Ｆ，Ｃａｐｒｉｏｌｉ　Ａ，Ｄｉ　Ｂａｒｔｏｌｏ　Ｉ，Ｃｉｂｉｎ　Ｖ，Ｐｅｚｚｏｔｔｉ　Ｇ，　Ｒｕｇｇｅｒｉ　ＦＭ，Ｏｓｔａｎｅｌｌｏ　Ｆ．Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｓｗｉｎｅ　ｔｏｒｑｕｅ　ｔｅｎｏ　ｖｉｒｕｓ　ｉｎ　Ｉｔａｌｉａｎ　ｐｉｇ　ｈｅｒｄｓ［Ｊ］．Ｊ　Ｖｅｔ　Ｍｅｄ　Ｂ　Ｉｎｆｅｃｔ　Ｄｉｓ　Ｖｅｔ　Ｐｕｂｌｉｃ　Ｈｅａｌｔｈ，２００６，５３（５）：２３４．２３８．　［１５］Ｓｅｇａｌｅｓ　Ｊ，Ｍａｒｔｉｎｅｚ－Ｇｕｉｎｏ　Ｌ，Ｃｏｒｔｅｙ　Ｍ，Ｎａｖａｒｒｏ　Ｎ，　Ｈｕｅｒｔａ　Ｅ，Ｓｉｂｉｌａ　Ｍ，Ｐｕｊｏｌｓ　Ｊ，Ｋｅｋａｒａｉｎｅｎ　Ｔ．Ｒｅｔｒｏｓｅｐｃｔｉｖｅ　ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｓｗｉｎｅ　Ｔｏｒｑｕｅ　ｔｅｎｏ　ｖｉｒｕｓ　ｇｅｎｏｇｒｏｕｐｓ　１　ａｎｄ　２　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　ｆｒｏｍ　１９８５　ｔｏ　２００５　ｉｎ　Ｓｐａｉｎ［Ｊ］．Ｖｅｔ　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ，　２００９，１３４（３＿４）：１９９．２０７．　［１６］　Ｍａｒｔｉｎｅｚ　Ｌ，Ｋｅｋａｒａｉｎｅｎ　Ｔ，Ｓｉｂｉｌａ　Ｍ，Ｒｕｉｚ．Ｆｏｒｔｓ　Ｆ，Ｖｉｄａｌ　Ｄ，Ｇｏｒｔａｚａｒ　Ｃ，Ｓｅｇａｌｅｓ　Ｊ．Ｔｏｒｑｕｅ　ｔｅｎｏ　ｖｉｒｕｓ（ＴｒＶ）ｉｓ　ｈｉｇｈｌｙ　ｐｒｅｖａｌｅｎｔ　ｉｎ　ｔｈｅ　Ｅｕｒｏｐｅａｎ　ｗｉｌｄ　ｂｏａｒ（Ｓｕｓ　ｓｃｒｏｆａ）［ＪＪ．　Ｖｅｔ　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ，２００６，１１８（３＿４）：２２３．２２９．　［１７］孙泉云，李凯航，张维谊，邓波，鞠厚斌，鞠龚讷．上海地区猪　和奶牛血清中ＴＴＶ（Ｔｏｒｑｕｅ　ｔｅｎｏ　ｖｉｒｕｓ）感染的检测［Ｊ］．中　国动物传染病学报，２００９，１７（２）：７８．８１．　［１８３王礞礞，周艳君，陈宗艳，于海，李国新，阎丽萍，姜一峰，侯军　委，童光志．我国猪群中１ＴｒＶ的鉴定及其分子流行病学分析　［Ｊ］．中国预防兽医学报，２００９，３１（１Ｏ）：７５１．７５５．　［１９］Ｂｒａｓｓａｒｄ　Ｊ，Ｇａｇｎｅ　ＭＪ，Ｌａｍｏｕｒｅｕｘ　Ｌ，Ｉｎｇｌｉｓ　ＧＤ，Ｌｅｂｌａｎｃ　Ｄ，Ｈｏｕｄｅ　Ａ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｂｏｖｉｎｅ　ａｎｄ　ｐｏｒｃｉｎｅ　Ｔｏｒｑｕｅ　ｔｅｎｏ　ｖｉｒｕｓ　ｉｎ　ｐｌａｓｍａ　ａｎｄ　ｆｅｃｅｓ［Ｊ］．Ｖｅｔ　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ，　２００８，１２６（１－３）：２７１－２７６．　［２０］　Ｍａｒｔｉｎｅｚ—Ｇｕｉｎ６　Ｌ，Ｋｅｋａｒａｉｎｅｎ　Ｔ，Ｓｅｇａｌ６ｓ　Ｊ．Ｅｖｉｄｅｎｃｅ　ｏｆ　Ｔｏｒｑｕｅ　ｔｅｎｏ　ｖｉｒｕ（ＴＴＶ）ｖｅｒｔｉｃａｌ　ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ　ｉｎ　ｓｗｉｎｅ［Ｊ］．　Ｔｈｅｒｉｏｇｅｎｏｌ０ｇｙ，２００９，７１（９）：１３９０—１３９５．　［２１］Ｐｏｚｚｕｔｏ　Ｔ，Ｍｕｅｌｌｅｒ　Ｂ，Ｍｅｅｈａｎ　Ｂ，Ｒｉｎｇｌｅｒ　ＳＳ，Ｍｃｌｎｔｏｓｈ　ＫＡ，Ｅｌｌｉｓ　ＪＡ，Ｍａｎｋｅｒｔｚ　Ａ．Ｋｒａｋｏｗｋａ　Ｓ．　Ｉｎ　ｕｔｅｒｏ　ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ｐｏｒｃｉｎｅ　ｔｏｒｑｕｅ　ｔｅｎｏ　ｖｉｕｒｓｅｓ［Ｊ］．Ｖｅｔ　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ，２００９，１３７（３．４）：３７５．３７９．　［２２］Ｋｅｋａｒａｉｎｅｎ　Ｔ，Ｌ６ｐｅｚ—Ｓｏｒｉａ　Ｓ，Ｓｅｇａｌ６ｓ　Ｊ．Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｓｗｉｎｅ　ｔｏｒｑｕｅ　ｔｅｎｏ　ｖｉｒｕｓ　ｇｅｎｏｇｒｏｕｐｓ　１　ａｎｄ　２　ｉｎ　ｂｏａｒ￥ｅｒａ　ａｎｄ　ｓｅｍｅｎ　［Ｊ］＿Ｔｈｅｒｉｏｇｅｎｏｌｏｇｙ，２００７，６８（７）：９６６—９７１．　（收稿日期：２０１０．０２．１２）