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文章编号：1673-80（2019）03-0246-03 中图分类号：R446.5 文献标志码：A DOI：10.3969/j.issn.1673-80.2019.03.013
广西柳州地区9 810例人乳头瘤病毒检测结果分析
蔡鹏飞，许泽辉，王敬仁，严提珍
（柳州市妇幼保健院医学遗传科 柳州市出生缺陷预防与控制重点实验室，广西 柳州 545000）
摘要：目的 分析广西柳州地区人乳头瘤病毒（HPV）分型结果，为HPV疫苗在柳州地区的应用提供流行病学参考。方法 提取患者样本DNA，采用聚合酶链反应（PCR）分析HPV亚型。结果 9 810例样本中检出HPV阳性样本1 396例，阳性检出率为14.23%；检出HPV高危型1 001例（10.20%），HPV低危型395例（4.03%）；在不同年龄段中，HPV检出率最高为<20岁组（59.46%），最低为>60岁组（0.00%）；1 396例HPV阳性样本中，单一检出1 202例，混合检出147例（以双重检出为主）。结论 广西柳州地区HPV分布有型别和年龄差异，应有针对性地选择适合本地区的HPV疫苗。
关键词：人乳头瘤病毒；基因分型；宫颈癌
Results' analysis of human papillomavirus determination of 9 810 patients in Liuzhou，Guangxi CAI Pengfei，XU Zehui，WANG Jingren，YAN Tizhen. （Department of Medical Genetics，Liuzhou Municipal Maternity and Child Healthcare Hospital，Key Laboratory of Birth Defects Prevention and Control，Liuzhou 545000，Guangxi，China）
Abstract：Objective To analyze the results of human papillomavirus （HPV） determination in Liuzhou，Guangxi，and to provide a reference for the prevention and control of HPV infection and HPV vaccine. Methods DNA was extracted. The types of HPV were analyzed by polymerase chain reaction（PCR）. Results The total positive rate was 14.23% （1 396/9 810）. The positive rates of high-risk HPV subtypes and low-risk HPV subtypes were 10.20% （1 001/9 810） and 4.03%（395/9 810），respectively. Among different age groups，the highest HPV carrying rate was in <20-year-old group （59.46%）. The HPV carrying rate in >60-year-old group was the lowest （0.00%）. There were 1 202 cases carrying 1 type of HPV and 147 cases carrying 2 or more types of HPV in 1 396 positive samples. In mixed infection，double infection was the majority. Conclusions HPV infection has difference in different ages and types. It should select appropriate HPV vaccine in local region.
Key words：Human papillomavirus；Genotyping；Cervical cancer
人乳头瘤病毒（human papillomavirus，HPV）是导致宫颈上皮增生和宫颈癌的主要因素[1]。目前，已分离鉴定出100余种HPV，其中确认可导致宫颈病变的HPV亚型超过30种，按其导致的病变程度分为低危型和高危型两大类。低危型HPV与外生殖器、肛周皮肤尖锐湿疣和低度宫颈上皮内瘤等良性肿瘤有关；高危型HPV与皮肤和黏膜恶性肿瘤（宫颈癌、肛门癌、阴茎癌等）相关，以宫颈癌最为常见[1-4]。本研究通过分析广西柳州地区HPV检测阳性率
供流行病学参考。1 材料和方法1.1 研究对象
选取2016年1月—2017年12月广西柳州市妇幼保健院就诊的9 810例女性，年龄17~82岁，对其相关临床资料进行回顾性分析。1.2 仪器与试剂
9700 PCR扩增仪（美国ABI公司），多功能流式点阵分析仪（美国Luminex公司）。HPV核酸分型检测试剂盒（流式荧光杂交法）购自上海透景生命科技股份有限公司。
及基因亚型，为HPV疫苗在柳州地区的应用提
基金项目：柳州市科学研究与技术开发计划项目（2014G020404）
作者简介：蔡鹏飞，男，19年生，学士，技师，主要从事疾病的分子诊断工作。通信作者：严提珍，E-mail：439078813@qq.com。
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1.3 方法
1.3.1 样本采集 以扩阴器暴露宫颈口，用棉拭子擦去宫颈口的分泌物，将宫颈刷紧贴宫颈口顺时针轻柔转动4~5周慢慢抽出，将宫颈刷头放入装有细胞保存液的洗脱管中，旋紧管盖，做好样本标识，并保持洗脱管直立放置。1.3.2 DNA提取 严格按照HPV核酸分型检测试剂盒（流式荧光杂交法）说明书提取DNA。1.3.3 聚合酶链反应 扩增条件为：95 ℃ 5 min；95 ℃ 30 s，58 ℃ 30 s，72 ℃ 30 s，5个循环；95 ℃ 30 s，55 ℃ 30 s，72 ℃ 30 s，35个循环；72 ℃ 3 min。杂交条件为：95 ℃ 5 min变性；48 ℃ 30 min杂交；48 ℃ 15 min孵育。1.3.4 基因型检测 共检测27个HPV基因亚型，其中包括10个低危型（6、11、43、83、40、81、44、55、42和61型）和17个高危型（16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66、68、82、53和26型）。1.4 统计学方法
采用SPSS 19.0软件对数据进行分析，计数资料以率表示，组间比较采用χ2检验。以P<0.05为差异有统计学意义。2 结果
2.1 HPV型别分布
共检出HPV阳性样本1 396例，阳性检出率为14.23%（1 396/9 810），其中2016年阳性检出率为15.60%（746/4 783），2017年阳性检出率为12.93%（650/5 027）。检出高危型HPV 1 001例，检出率为10.20%（1 001/9 810），其中52型检出率最高（16.40%，229/1 396），26型检出率最低（0.14%，2/1 396）；低危型HPV 395例，检出率为4.03%（395/9 810），其中81型检出率最高（18.73%，74/395），40型检出率最低（0.76%，3/395），差异有统计学意义（χ2=16.85，P<0.05）。2016年和2017年高危型HPV检出率最高均为52型，检出率居第2位的分别是16型（15.23%，81/532）、58型（15.57%，73/469），出现了变迁；2016、2017年低危型HPV检出率最高分别为43型（17.76%）、81型（24.31%），出现了变迁。见表1。2.2 不同年龄段HPV检出情况
将研究对象按年龄分为<20岁组、20~30岁
表1 HPV各亚型检出率基因型2016年
2017年
例数百分率（%）例数百分率（%）高危型
5212723.8710221.75 168115.235010.66 586912.977315.57 53407.52388.10 39336.20367.67 18254.70326.82 51254.70326.82 56234.32255.33 66152.82234.91 59213.95204.26 33234.3291.92 35142.6391.92 8261.1381.71 31122.2661.27 68112.0720.43 4550.9440.85 2620.3800.00低危型 813014.024424.31 44 3415.2815.47 433817.762111.60 552913.552111.60 61209.352011.05 06209.351910.50 42209.35137.18 11146.54116.08 8373.2731.66 40
2
0.93
1
0.55
组、31~40岁组、41~50岁组、51~60岁组和>60岁组5个组。<20岁组HPV的检出率最高，>60岁组检出率最低。见表2。
表2 不同年龄组HPV检出情况组别总例数检出例数检出率（%）
<20岁组372259.4620~30岁组2 87044615.5431~40岁组5 72775313.1541~50岁组1 11215814.2051~60岁组501734.00>60岁组1400.00合计9 810
1 396
14.23
2.3 HPV混合检出情况
1 396例HPV阳性样本中，单一检出1 202例，检出率为86.10%；混合检出中以双重检出为主，共147例，检出率为10.53%；三重检出、
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四重及以上检出分别为35例（2.51%）、12例（0.86%），差异有统计学意义（χ2=507.93，P<0.05）。3 讨论
HPV感染是常见的性传播疾病，高危型HPV持续感染是宫颈癌变的主要病因之一，HPV DNA分型是大样本宫颈癌筛查最经济、简便、有效的方式，早期筛查是宫颈癌防治的关键[5-6]。对不同地区HPV检出情况进行流行病学分析，并依据年龄建立易感型别基因库具有重要的临床意义。
本研究结果显示，HPV的阳性检出率为14.23%，与惠州、顺德地区相近，低于洛阳、上海、重庆等地区[6-12]，表明不同地区HPV检出率有差异。本研究9 810例临床样本中，2017年HPV阳性检出率（12.93%）低于2016年（15.60%） ，原因可能是HPV防治越来越被重视，使HPV感染逐渐减少。本研究发现，柳州地区高危型HPV检出率（10.20%）高于低危型HPV检出率（4.03%），高危型HPV基因亚型居前3位的分别为52、16和58型，低危型HPV居前3位的分别为81、44和43型，与惠州、顺德和洛阳等地区流行亚型不同[6-8]，表明高危型HPV更普遍，且不同地区HPV基因型别存在明显差异。本研究结果表明，高危型HPV检出率居第2位的2016年为16型，2017年为58型，出现了变迁；低危型HPV检出率最高2016年为43型、2017年为81型，出现了变迁，提示HPV型别在不同时间段检出情况存在一定差异。
本研究HPV检出率最高的是<20岁组（59.46%），51~60岁组（34.00%）位居第二。有研究结果表明，HPV在20~24岁与50~54岁出现2个检出高峰[8]，第1个高峰的出现可能是由于这个年龄段女性性生活相对活跃且缺乏自我保护意识；随着年龄的增加，女性激素分泌的改变使生理和免疫功能发生紊乱，出现第2个检出高峰[13]。本研究中第1个检出高峰为<20岁组，可能是本研究中该年龄段的患者例数偏少，出现了一定的统计学差异，导致检出率偏高，也可能与社会发展有关；第2个检出高峰为51~60岁组，与相关文献[8]结论基本一致，说明年龄也是影响HPV检出率的重要因素。
本研究1 396例HPV阳性病例中，以单一
检出为主（86.10%），混合检出中又以双重检出为主（10.53%），与陈栋等[12]报道的重庆地区的检出结果相似。HPV亚型混合检出率近年来有所上升，提示未来HPV的防控任重道远，更体现了HPV分型诊断对于临床治疗的重要意义。
综上所述，HPV检出率有型别和年龄差异，宫颈癌的防控及HPV疫苗的使用应以本地实际情况为参考依据。
参考文献
[1]
KANG H S，DE GAGNE J C，SON Y D， et al. Completeness of human papilloma virus vaccination： a systematic review[J]. J Pediatr Nurs， 2018， 39：7-14.[2]
梁朝霞，陆东阁，葛林，等. 子宫颈感染人乳头瘤病毒的基因分布特点分析[J]. 中国实用医药，2018，13（4）：52-53.
[3]
SCHIFFMAN M，CLIFFORD G， BUONAGURO F M. Classification of weakly carcinogenic human papillomavirus types：addressing the limits of epidemiology at the borderline[J]. Infect Agent Cancer， 2009，4：8.
[4] 李巍巍. HPV检测应用于早期宫颈癌筛查中的意义[J]. 中国实用医药，2018，13（4）：51-52.
[5]
张雪丹，翁跃颂. HPV DNA分型联合“三阶梯”技术对子宫颈癌前病变诊断及预后判断的价值[J]. 检验医学，2017，32（11）：990-993.
[6]
李旭艳. 惠州地区人乳头瘤病毒（HPV）的亚型分布特点及其与年龄的相关性分析[J]. 中国医学创新， 2015， 12（21）：102-104.
[7]
刘国强，张朝红，陈建军， 等. 顺德地区妇女人乳头瘤病毒感染类型分布研究[J]. 检验医学与临床，2014，11（19）：2726-2727.
[8]
王晓川，孙良起，王欣，等. 洛阳地区201例女性感染HPV及亚型分布特征分析[J]. 河南科技大学学报（医学版）， 2014， 32（4）：290-292.
[9]
XUE Y，ZHANG W，CHEN M，et al．\"U\" shape of age-specific prevalence of high-risk human papillomavirus infection in women attending hospitals in Shanghai， China[J]. Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol， 2009， 145（2） ： 214-218．
[10]
黄路遥，许燕燕，娄晓丽，等. 上海市松江区人乳头瘤病毒感染情况分析[J]. 检验医学，2017，32（8）：695-699.
[11]
李军，王一羽，南星，等. 陕西省咸阳地区人乳头瘤病毒的基因分型及亚型分布特征[J]. 检验医学，2017，32（3）：194-198.
[12]
陈栋，王贵宇，王丰，等. 重庆地区人乳头状瘤感染及其基因型分布特点[J]. 中华医院感染学杂志，2011，21（10）：2025-2026.
[13]
徐红，王德录，杜文杰. 人乳头瘤病毒感染的临床实验结果分析[J]. 检验医学，2016，31（9）：770-773.
（收稿日期：2017-11-09）
（本文编辑：李 欣）