海洋细菌Bn-103产抑菌物质发酵条件及部分理化性质

第２６卷第５期　食品与生物技术学报　Ｖｏ１．２６　Ｎｏ．５　２００７年９月　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｆｏｏｄ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　Ｓｅｐ．　２００７　文章编号：１６７３—１６８９（２００７）Ｏ５一Ｏ１１Ｏ—Ｏ６　海洋细菌Ｂｎ一１０３产抑菌物质发酵条件　及部分理化性质　张超，　祖国仁　孑Ｌ繁东，　文０阳　（大连轻工业学院生物与食　品工程学院，辽宁大连１１６０３４）　摘要：对从海泥中分离到的一株海洋细菌Ｂｎ一１０３产抑菌物质的培养基、发酵条件及所产抑菌物　质的热稳定性、ｐＨ值稳定性进行了初步研究。结果表明，海洋细菌Ｂｎ－１０３适宜培养基成分组合　为：葡萄糖１　ｇ／ｄＬ，蛋白胨０．１～Ｏ．３　ｇ／ｄＬ，酵母膏０．１　ｇ／ｄＬ，海水添加量６Ｏ　～８Ｏ　；培养基初始　ｐＨ　５．Ｏ～７．０；接种体积分数２　～４　；发酵时间４８～７２　ｈ；抑茵物质８Ｏ℃处理９０　ｍｉｎ，保留活性　８Ｏ　以上，ｐＨ值稳定在ｐＨ　３～８之间。　关键词：海洋细菌；抑菌物质；发酵条件　中图分类号：ＴＱ　９２０．１　文献标识码：Ａ　Ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　Ｔｈｅ　Ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ　Ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　ａｎｄ　Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ　０ｆ　Ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ　Ｓｕｂｓｔａｎｃｅ　Ｐｒｏｄｕｃｅｄ　ｂｙ　ａ　Ｍａｒｉｎｅ　Ｂａｃｔｅｒｉａ　Ｂｎ－１０３　ＺＨＡＮＧ　Ｃｈａｏ，　ＺＵ　Ｇｕｏ－ｒｅｎ，　ＫＯＮＧ　Ｆａｎ—ｄｏｎｇ，　ＬＩＵ　Ｙａｎｇ　（Ｓｃｈｏｏｌ　ｏｆ　Ｂｉｌｏｌｇｉｃａｌ　ａｎｄ　Ｆｏｏｄ　Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｄａｌｉａｎ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｏｆ　Ｌｉｇｈｔ　Ｉｎｄｕｓｔｒｙ，Ｄａｌｉａｎ　１１６０３４，Ｃｈｉｎａ）　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ　ｍａｎｕｓｃｒｉｐｔ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ　ｔｈｅ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｍｅｄｉｕｍ　ａｎｄ　ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　ｏｎ　ｔｈｅ　ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ　ｓｕｂｓｔａｎｃｅ　ｐｒｏｄｕｃｅｄ　ｓｔｒａｉｎ　Ｂｎ一１０３　ｗｈｉｃｈ　ｗａｓ　ｉｓｏｌａｔｅｄ　ｆｒｏｍ　ｏｏｚｅｄ　ｓｅａ　ｗａｔｅｒ．Ｉｔｓ　ｓｔａｂｉｌｉｔｙ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｐＨ　ａｎｄ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｗｅｒｅ　ａｌｓｏ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍｕｍ　ｍｅｄｉｕｍ　ｆｏｒ　ｓｔｒａｉｎ　Ｂｎ一１０３　ｗａｓ：１　ｇｌｕｃｏｓｅ，０．１～Ｏ．３　ｇ／Ｌ　ｐｅｐｔｏｎｅ，０．１　ｇ／Ｌ　ｙｅａｓｔ　ｅｘｔｒａｃｔ，６０　～８Ｏ　ｓｅａ　ｗａｔｅｒ．Ｔｈｅ　ｂｅｓｔ　ｐＨ　ｗａｓ　５．０～７．０　ｔｈｅ　ｉｎｏｃｕｌａｔｅ　ｒａｔｉｏ　ｗａｓ　２　～４　，ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ　ｔｉｍｅ　ｗａｓ　４８～７２　ｈ．Ｔｈｅ　ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ　ｓｕｂｓｔａｎｃｅ　ｗａｓ　ｔｒｅａｔｅｄ　ｕｎｄｅｒ　８０　ｆｏｒ　９０　ｍｉｎ，ｔｈｅ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｒｅｍａｉｎｅｄ　ｕｐ　ｔｏ　８０％，ｉｔ　ｉＳ　ｓｔａｂｌｅ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｔｈｅ　ｐＨ　３　ｔｏ　８．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：ｍａｒｉｎｅ　ｂａｃｔｅｒｉａ；ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ　ｓｕｂｓｔａｎｃｅ；ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ　微生物是自然界中生物的一大类群，与人类生　些腐烂菌和病原菌，在食品的防腐保鲜方面起重要　活密切相关。一些具有抑菌生物活性的物质，如乳　作用　。近几年来，研究者逐渐将目光转移到海洋　酸菌细菌素、杆菌肽等，可以杀死或抑制食物中一　微生物。由于独特的生存环境及海洋生物物种间　收稿日期：２００７—０１—０６．　作者简介：张超（１９８１一），男，山西栖霞人，生物活性物质硕士研究生．Ｅｍａｉｌ：ｓｕｐｅｒｍａｎ１９８１１１０６＠ｓｏｈｕ．ｔｏｍ　通讯作者：祖国仁（１９６３一），男，吉林四平人，副教授，工学硕士，主要从事微生物活性物质方面的研究．　Ｅｍａｉｌ：ｒｇｚ３２１＠１６３．ｔｏｍ　维普资讯 http://www.cqvip.com

第５期　张超等：海洋细茵Ｂｎ一１０３产抑茵物质发酵条件及部分理化性质　１１１　的生态作用远比陆生物种复杂和广泛＿３］，因此，赋　予海洋生物的活性远比陆生生物要强，尤其重要的　是这些物质化学结构丰富多样，许多分子结构新颖　独特，是陆生生物所不具有的【４］。丰富的海洋生物　资源无疑是天然药物筛选的重要来源。从天然产　物中寻找新的抗肿瘤活性物质已成为抗癌新药开　发的研究热点。据估计，目前只有不足５　的海洋　微生物可以鉴定，已发现的活性物质只占总数的　１　。因此，海洋微生物资源的研究开发和应用越　来越受到世界各国特别是沿海国家的重视＿５　］。作　者报导一株海洋细菌Ｂｎ－１０３产抑菌物质的发酵条　件及其部分理化性质。　１材料与方法　１．１实验材料　１．１．１　茵株　海洋细菌Ｂｎ－１０３：从大连黑石礁海　域海泥中分离得到；指示菌：藤黄八叠球菌（Ｓａｒｃｉｎａ　ｌｉｔｅａ），大肠埃希氏菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　ｃｏｌｉ）：由大连轻　工业学院生物与食品工程学院微生物教研室保藏。　１．１．２培养基　１）指示菌培养基：牛肉膏蛋白胨培养基［９］。　２）发酵培养基：葡萄糖１０　ｇ，蛋白胨２　ｇ，酵母　膏１　ｇ，海水６００　ｍＬ，蒸馏水４００　ｍＬ［１　。　３）种子培养基：同发酵培养基。　４）试管斜面培养基：发酵培养基加２　ｇ／ｄＬ琼　脂。　１．１．３仪器ＹＸＱ－ＳＧ４６－２８０ＳＡ手提式高压消毒　器：上海市医疗仪器厂制造；ＺＨＷＹ－２１０２Ｃ空气恒　温振荡器：上海智城分析仪器制造有限公司制造；　ＴＧＬ－１６Ｇ高速离心机：上海安亭科学仪器厂制造；　ＨＨ一６型恒温水浴锅：江苏金坛市中大仪器厂制造；　牛津杯等。　１．２实验方法　１．２．１抑茵试验一管碟法　将指示菌培养基２Ｏ　ｍＬ倒人灭菌的平皿，凝固后，滴人０．１　ｍＬ指示菌　菌液（指示菌体浓度２．５×１０。ｃｆｕ／ｍＬ，稀释倍数　１０。），用三角刮刀涂匀后，于培养皿中放人无菌牛　津杯，滴人离心后（１６　０００　ｒ／ｍｉｎ离心１５　ｍｉｎ）的发　酵液８Ｏ　Ｌ，以空白培养基作对照，３Ｏ℃下培养４８　ｈ，测定抑菌圈大小（抑菌圈为测量值减去空白值），　每个试验点做６个平行样，以平均值作为最终试验　值Ｅｌ１］。　１．２．２培养条件试验　１）培养基配方优化设计：以发酵培养基中对海　洋细菌Ｂｎ－１０３生长和产抑菌物质影响较大的因　素，葡萄糖、蛋白胨和海水添加量为试验因素，设计　３个水平，进行Ｌ。（３　）正交试验，见表１。　表１正交试验因素水平表　Ｔａｂ．１　Ｔｈｅ　ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ　２）发酵条件试验：海洋细菌Ｂｎ一１０３活化菌株　一环接人种子培养基，２８℃，１８０　ｒ／ｍｉｎ摇床振荡　２４　ｈ，取一定量加入２５０　ｍＬ发酵三角瓶中，２８℃摇　床振荡一定时间，按方法１．２．１测定不同条件的抑　菌活性。　１．２．３海洋细菌Ｂｎ一１０３发酵液中抑茵物质部分　理化性质　１）热稳定性试验：离心后的发酵液分别置于不　同的水浴中处理不同时间，测定抑菌活性。　２）ｐＨ值稳定试验：离心后的发酵液分别调至　不同ｐＨ值，处理一定时间，测定抑菌活性。　２结果与分析　２．１培养基配方各组分优化　按方法１．２．２培养基配方优化设计进行正交　试验，测定不同组合的抑菌效果，结果见表２。　由表２的极差大小可知，各因素影响主次顺序　为：对大肠埃希氏菌Ｃ＞Ａ＞Ｂ，即海水添加量＞葡　萄糖＞蛋白胨；抑菌效果最好的因素水平组合Ａ。　Ｂ。Ｃ。，即葡萄糖１　ｇ／ｄＬ，蛋白胨０．３　ｇ／ｄＬ，海水添　加量６０　ｇ／ｄＬ；对藤黄八叠球菌Ｃ＞Ｂ＞Ａ，即海水　添加量＞蛋白胨＞葡萄糖；抑菌效果最好的因素水　平组合Ａ。Ｂ。Ｃ。，即葡萄糖１　ｇ／ｄＬ，蛋白胨０．１　ｇ／ｄＬ，海水添加量８Ｏ　。从试验结果可知，影响海　洋细菌Ｂｎ－１０３发酵产抑菌物质的首要因素是海水　的添加量，其次才是碳源或氮源，培养基配方中海　水添加量的多少影响培养基中无机元素的含量。　当培养基中碳源含量相同，有较高的海水添加量和　较低的蛋白胨质量分数时，海洋细菌Ｂｎ－１０３产抑　菌物质对革兰氏阳性细菌藤黄八叠球菌抑菌效果　较好；而有较高的海水添加量和较高的蛋白胨质量　分数时，则对革兰氏阴性细菌大肠埃希氏菌抑菌效　果较好。图１，２为海洋细菌Ｂｎ一１０３产抑菌物质分　别对大肠埃希氏菌和藤黄八叠球菌的抑菌效果。　维普资讯 http://www.cqvip.com

１１２　食　品　与　生　物　技　术　学　报　第２６卷　图１大肠埃希氏菌　Ｆｉｇ．１　Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　ｃｏｌｉ　图２藤黄八叠球菌　Ｆｉｇ．２　Ｓａｒｃｉｎａ　Ｕｔｅａ　维普资讯 http://www.cqvip.com 第５期　张超等：海洋细菌Ｂｎ－１０３产抑菌物质发酵条件及部分理化性质　１１３　２．２培养基初始ｐＨ值对海洋细菌Ｂｎ一１０３产抑茵　活性物质的影响　在一定基质中，接种量的多少直接影响微生物　的生长，进而影响微生物代谢产物的量。选取生长　对数期种子大量接种，使微生物迅速繁殖产生大量　菌体，有利于产生较高代谢产物；但培养基质有限，　对发酵培养基调取初始ｐＨ值，分别为４．０、　５．０、６．０、７．０、８．０、９．０按１．２．２方法进行抑菌试　验，结果见表３。　捣　７　８　２　接种量过高时，也影响其生长和代谢产物的产生，　６　８　２　表３培养基初始ｐＨ值对Ｂｎ－１０３产抑菌物质的影响　Ｔａｂ．３　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｉｎｉｔｉａｌ　ｐＨ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ　ＳＵｂｓｔａｎｃｅ　ｂｙ　Ｂｎ－１０３　培养基　抑菌圈直径／ｍｍ　初始ｐＨ值　藤黄八叠球菌　大肠埃希氏菌　４．０　１Ｏ．１　５．０　１５．４　６．０　２Ｏ．５　７．０　２Ｏ．４　８．０　１Ｏ．８　９．Ｏ　９．７　不同种类的微生物都有其最适生长ｐＨ值范　围，而且同一种微生物在不同的生长阶段和不同的　生理、生化过程中也有不同的最适ｐＨ值要求。研　究其规律，控制发酵过程中的ｐＨ值，促使微生物产　生有益的物质十分必要。由表３可见，海洋细菌　Ｂｎ一１０３在培养基初始ｐＨ值５．０～６．０时，发酵产　抑菌物质对藤黄八叠球菌抑菌效果较好，以ｐＨ　６．０　抑菌效果最好；而在ｐＨ　６．０～７．０对大肠埃希氏菌　抑菌效果较好。　２．３接种量对菌株Ｂｎ一１０３产抑茵活性物质的影　晌　将活化的海洋细菌Ｂｎ－１０３接入装有种子培养　基的三角瓶中，在一定温度下培养一定时间，分别　选取体积分数１　９／５、２　、４％、６　、８　９／５、１０　９／５接种量　进行抑菌试验，结果见表４。　表４接种量对Ｂｎ－１０３产抑菌活性物质的影响　Ｔａｂ．４　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｉｎｏｃｕｌａｔｅ　ｒａｔｉｏ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ａｎｔｉ－　ｂａｃｔｅｒｉａｌ　ｓｕｂｓｔａｎｃｅ　ｂｙ　Ｂｎ－１０３　抑菌圈直径／ｒａｍ　接种体积分数／　——　藤黄八叠球菌　大肠埃希氏菌　而从生产实际考虑也是不经济的，因此采用体积分　数２　９／６和４　９／５的接种量。　２．４培养基装液量对菌株Ｂｎ－１０３产抑茵活性物质　的影响　选取发酵培养基装液量分别为２５、５０、７５、１００、　１２５、１５０　ｍＬ，进行抑菌试验，结果见表５。　表５培养基装液量对Ｂｎ－１０３产抑菌活性物质的影响　Ｔａｂ．５　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｖｏｌｕｍｅ　ｏｆ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｍｅｄｉｕｍ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ　ｓｕｂｓｔａｎｃｅ　ｂｙ　Ｂｎ－１０３　抑菌圈直径／ｒａｍ　装液量／ｍＬ——　藤黄八叠球菌　大肠埃希氏菌　∞　在一定体积的容器和一定摇床转速条件下，培　养基装液量的多少会影响氧的含量，通氧量的多少　会直接影响菌体的生长和代谢产物的产生。由表５　¨　Ｈ　他　３　５　２　８　５　２　可知，当培养基装量为５０　ｍＬ／２５０　ｍＬ时，海洋细菌　Ｂｎ一３０１发酵产抑菌物质对藤黄八叠球菌抑菌活性　较强；当装量为１００　ｍＬ／２５０　ｍＬ时，对大肠埃希氏　菌抑菌活性较强。从试验结果可以看出，较强的通　氧量有利于产生抑制革兰氏阳性细菌藤黄八叠球　菌的活性物质。　２．５发酵时间、茵体生长量与海洋细菌Ｂｎ－１０３产　抑茵物质关系　选取发酵时间分别为２４、４８、７２、１２０、１４４、１６８、　１９２　ｈ，测定其抑菌活性，同时测定其菌体生长的生　物量，结果见图３。　细菌的生长是有一定规律的，一般是接种后过　了迟缓期就进入了高速对数生长期，菌体的生物量　大量积累，之后进入稳定期，许多重要的代谢产物　在此时产生。由图３可知，海洋细菌Ｂｎ一１０３在２４　ｈ　就开始进入快速生长期，１２０　ｈ达到生长高峰，之后　进入稳定期。但产生抑菌物质的时间并不是在稳　定期，而是从菌体生长就开始了，对大肠埃希氏菌　抑菌效果最好的时间是４８　ｈ，对藤黄八叠球菌抑菌　维普资讯 http://www.cqvip.com １１４　效果最好的时间是在７２　ｈ。　食品　与　生物技术　学报　第２６卷　降低；当ｐＨ达到１０以上时，抑菌物质活性完全　丧失。　表７　Ｂｎ－１０３产抑菌物质ｐＨ稳定性试验　Ｔａｂ．７　Ｔｈｅ　ｐＨ　ｓｔａｂｉｌｉｔｙ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ　ｏｆ　ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ　ｓｕｂｓｔａｎｃｅ　妻　罂　发酵时间　图３发酵时间、菌体生长与Ｂｎ－１０３产抑菌物质的关　系　Ｆｉｇ．３　Ｔｈｅ　ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ　ａｍｏｎｇ　ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ　ｔｉｍｅ。ｍｙｃｅ。　ｌｉｕｍ　ｇｒｏｗｔｈ　ａｎｄ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ　ｓｕｂ。　ｓｔａｎｃｅ　ｂｙ　Ｂｎ－１０３　２．６海洋细菌Ｂｎ－１０３产抑菌物质部分理化性质　＾　２　３　４　２．６．１　热稳定性发酵液离心后，在７０、８０、９０℃　茸　中水浴。分别放置３０、６０、９０　ｍｉｎ，测定其抑菌活　性，结果见表６。　表６　Ｂｎ－１０３产抑菌物质热稳定性试验　Ｔａｂ．６　Ｔｈｅ　ｔｈｅｒｍｏｓｔａｂｉｌｉｔｙ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ　ｏｆ　ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ　ｓｕｂ－　ｓｔａｎｃｅ　ｐｒｏｄｕｃｅｄ　ｂｙ　Ｂｎ－１０３　７　２　１　６　・　抑菌圈直径／ｒａｍ　项目　水浴时间　对照　３０　ｒａｉｎ　６０　ｒａｉｎ　９０　ｒａｉｎ　（７０℃）藤黄八叠球菌　３２．８　３２．６　２　３２．８１　　２　ｃ；　３１．３　Ｌ　２　３　Ｏ　４　２　大肠埃希氏菌　２３．６　２３．７　２３．１　２２．９　（８０℃）藤黄八叠球菌　３２．８　３２．９　３１．８　２８．６　大肠埃希氏菌　２３．６　２３．５　２１．４　１９．６　（９０℃）藤黄八叠球菌　３２．８　２９．５　２４．０　２０．８　大肠埃希氏菌　２３．６　２１．３　１８．６　１６．５　由表６可见，随着温度的升高，时间的延长，海　洋细菌Ｂｎ－３０１抑菌物质的抑菌生物特性变化不　大，在７０℃下处理９０　ｍｉｎ，对海洋细菌Ｂｎ一３０１产　生的抑菌活性物质稳定性影响不大；８０℃处理９０　ｍｉｎ抑菌物质活性仍保留在８Ｏ　以上，９Ｏ℃处理　９０　ｍｉｎ抑菌物质活性保留为６０　，说明该物质的热　稳定性比较强。　２．６．２　ｐＨ值稳定性发酵液离心后分别调至ｐＨ　值为２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１，室温放置３０　ｍｉｎ，测　定其抑菌活性，结果见表７。　从表７可见，在ｐＨ　３～８之间，抑菌物质活性　变化不大；当ｐＨ　２或ｐＨ　９时，抑菌物质活性明显　ｐｒｏｄｕｃｅｄ　ｂｙ　Ｂｎ－１０３　培养基　抑菌圈直径／ｍｍ　初始ｐＨ值　藤黄八叠球菌　大肠埃希氏菌　６　７　８　９　ｕ　４　Ｏ　揪　６　２　无　无　３　结　论　２　１）海洋细菌Ｂｎ－１０３产抑菌物质适宜培养基成　２　１　＆　１　Ｌ　无　无　分组合为：对藤黄八叠球菌，葡萄糖１Ｏ　５　６　Ｏ　　ｇ／ｄＬ，蛋白胨　０．１　ｇ／ｄＬ，酵母膏０．１　ｇ／ｄＬ，海水添加量８０　９／６，蒸馏　水２０　；对大肠埃希氏菌，葡萄糖１　ｇ／ｄＬ，蛋白胨　０．３　ｇ／ｄＬ，酵母膏０．１　ｇ／ｄＬ，海水添加量６０　；蒸馏　水４０　。　２）海洋细菌Ｂｎ－１０３在培养基初始ｐＨ　５．０～　６．０，接种体积分数２　９／６，培养基装液量５０　ｍＬ／２５０　ｍＬ，对藤黄八叠球菌抑菌效果较好；而在培养基初　始ｐＨ　６．０～７．０，接种体积分数４　，培养基装液量　１００　ｍＬ／２５０　ｍＬ，对大肠埃希氏菌抑菌效果较好。　３）海洋细菌Ｂｎ－１０３培养２４　ｈ进入对数生长　期，１２０　ｈ达到生长高峰，对大肠埃希氏菌和藤黄八　叠球菌抑菌效果最好的培养时间分别为４８　ｈ　和７２　ｈ。　４）海洋细菌Ｂｎ－１０３产抑菌物质对热稳定性较　强，在７０℃下处理９０　ｍｉｎ，抑菌物质生物活性变化　不大；８０℃处理９０　ｍｉｎ抑菌物质活性仍保留在　８０　以上，９０℃处理９０　ｍｉｎ抑菌物质活性保留为　６０　。在ｐＨ　３～８之间，抑菌物质生物活性差异不　５　２　２　Ｌ　８　维普资讯 http://www.cqvip.com 第５期　张超等：海洋细菌Ｂｎ一１０３产抑菌物质发酵条件及部分理化性质　１１５　大，当ｐＨ　２或ｐＨ　９时，抑菌物质活性降低明显；当ｐＨ达到１０以上时，抑菌物质活性完全丧失。　参考文献（Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓ）：　［１］沈莲清，苏光耀，王向阳．植物乳杆菌素研究进展［Ｊ］．食品与生物技术学报，２００６，２５（５）：１２１—１２６．　ＳＨＥＮ　Ｌｉａｎ—ｑｉｎｇ，ＳＵ　Ｇｕａｎｇ—ｙａｏ，ＷＡＮＧ　Ｘｉａｎ—ｙａｎｇ．Ｐｒｏｇｒｅｓｓ　ｏｎ　ｐｌａｎｔａｒｉｃｉｎ　ｂｙ　Ｌ．ｐｌａｎｔａｒｕｍ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｆｏｏｄ　Ｓｃｉ－　ｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｉｏｇｙ，２００６，２５（５）：１２１—１２６．（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ）　［２］雷波．杆菌肽发酵的培养基优化及影响其检测的因素［Ｊ］．食品与生物技术学报，２００６，２５（６）：７９—８２．　ＬＥＩ　Ｂｏ．Ｃｕｌｔｕｒｅ　ｍｅｄｉｕｍ　ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｂａｃｔｅｒｉａｎ　ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｉｎｆｌｕｅｎｃｅｓ　ｉｔｓ　ｆａｃｔｏｒ　ｍｅａｓｕｒｅｄ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｆｏｏｄ　Ｓｃｉ－　ｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｉｏｇｙ，２００６，２５（６）：７９—８２．（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ）　［３］展翔天，张春光，司玫．海洋微生物活性物质研究进展［Ｊ］．中国海洋药物杂志，２００２，２：４４—５２．　ＺＨＡＮ　Ｘｉａｎｇ—ｔｉａｎ，ＺＨＡＮＧ　Ｃｈｕｎ—ｇｕａｎｇ，ＳＩ　Ｍｅｉ．Ｒｅｓｅａｒｃｈ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ｏｆ　ｂｉｏａｃｔｉｖｅ　ｓｕｂｓｔａｎｃｅ　ｏｆ　ｍａｒｉｎｅ　ｍｉｃｒｏｏｇａｎｉｓｍｓ　［Ｊ］．Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｍａｒｉｎｅ　Ｄｒｕｇｓ，２００２，２：４４—５２．（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ）　［４］Ｃａｒｔｅ　Ｂ　Ｋ．Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ　ｐｏｔｅｎｔｉａｌ　ｏｆ　ｍａｒｉｎｅ　ｎａｔｕｒａｌ　ｐｒｏｄｕｃｔｓ［Ｊ］．Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ，１９９６，４６（４）：２７１—２８６．　［５］李越中，陈琦．海洋微生物资源及其产生生物活性代谢物的研究［Ｊ］．生物工程进展杂志，２０００，２０（５）：２８—３１．　ＬＩ　Ｙｕｅ－ｚｈｏｎｇ，ＣＨＥＮ　Ｑｉ．Ｔｈｅ　ｓｏｕｒｃｅｓ　ｏｆ　ｍａｒｉｎｅ　ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｓ　ａｎｄ　ｔｈｅｉｒ　ｂｉｏａｃｔｉｖｅ　ｍｅｔａｂｏｌ　ｉｔｅｓ［Ｊ］．Ｐｒｏｇｒｅｓｓ　ｉｎ　Ｂｉｏｔｅｃｈ－　ｎｏｉｏｇｙ，２０００，２０（５）：２８—３１．（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ）　［６］郑忠辉，李军，黄耀坚，等．海洋微生物潜在的抗肿瘤活性物质的初步筛选［Ｊ］．海洋通报，１９９９，１８（３）：２Ｏ一２３．　ＺＨＥＮ　Ｚｈｏｎｇ—ｈｕｉ，ＬＩ　Ｊｕｎ，ＨＵＡＮＧ　Ｙａｏ－ｊｉａｎ　ｅｔ　ａ１．Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ　ｏｆ　ｐｏｔｅｎｔｉａｌ　ａｎｔｉｔｕｍｏｒ　ａｇｅｎｔｓ　ｐｒｏｄｕｃｅｄ　ｂｙ　ｍａｒｉｎｅ　ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎ—　ｉｓｍｓ［Ｊ］．Ｍａｒｉｎｅ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　Ｂｕｉｌｅｔｔｎ，１９９９，１８（３）：２Ｏ一２３．（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ）　［７］Ｊｅｎｓｅｎ　Ｐ　Ｒ，Ｆｅｎｉｃａｌ　Ｗ、Ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ　ｏｆ　ｓｅｃｏｎｄａｒｙ　ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ　ｆｒｏｍ　ｍａｒｉｎｅ　ｂａｃｔｅｒｉａ：ｅｃｏｌｏｇｉｃａｌ　ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅｓ　［Ｊ］．Ａｎｎｕ　Ｒｅｖ　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ，１９９４，４８：５５９—５８４．　［８］林维宣．试验设计方法［Ｍ］．大连：大连海事大学出版社，１９９５：３３１．　［９］沈萍，范秀容，李广武．微生物学实验［Ｍ］．北京：高等教育出版社，１９９９：１１１—２１５．　［１Ｏ］林永城．海洋微生物及其代谢产物［Ｍ］．北京：化学工业出版社，２００３：３６．　［１１］马绪荣，苏德模．药品微生物检验手册［Ｍ］．北京：科学出版社，２０００：２２９—２４２．　（责任编辑：李春丽）